本文關(guān)鍵詞：shRNA沉默HBx下調(diào)HepG2.2.15細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2的表達

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【摘要】：目的探討HBx小發(fā)夾RNA(shRNA)對HepG2.2.15細胞中基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)表達的影響。方法采用psiHBV/X質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2.2.15細胞,反轉(zhuǎn)錄PCR評估沉默效率;MTT法檢測轉(zhuǎn)染后HepG2.2.15細胞增殖情況;實時定量PCR(qRT-PCR)檢測MMP-2 mRNA表達;Western blot法檢測MMP-2蛋白表達的變化。結(jié)果反轉(zhuǎn)錄PCR檢測HBx基因的沉默效率為53.6%;MTT檢測結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染24、48、72 h后HepG2.2.15細胞的增殖受抑制,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);psiHBV/X質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2.2.15細胞后,qRT-PCR和Western blot檢測結(jié)果顯示,HepG2.2.15細胞中MMP-2基因的mRNA水平和蛋白水平表達分別有不同程度的下調(diào),與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 RNA干擾技術(shù)抑制HepG2.2.15細胞中HBx基因的表達,可抑制細胞增殖,下調(diào)HepG2.2.15細胞中MMP-2的表達。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院生化教研室;天津生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物制藥系;天津藥業(yè)研究院有限公司;
【關(guān)鍵詞】： RNA干擾 HBx基因 HepG..細胞 MMP-
【基金】：貴州省聯(lián)合基金(黔科合J字LKZ[2011]33號) 遵義市紅花崗區(qū)科技基金[(2010)16]
【分類號】：R363
【正文快照】： 全球有3.5億人感染乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV),感染HBV是肝臟疾病的主要原因[1],HBV是肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的致病因子已得到公認。腫瘤的擴散、轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的主要特征,肝癌細胞的連續(xù)增殖和不斷分化是肝癌轉(zhuǎn)移浸潤的重要原因之一。基質(zhì)金屬蛋白酶

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本文編號：551151