加熱對大鼠表皮干細胞HSP70表達及細胞增殖的影響
本文關(guān)鍵詞:加熱對大鼠表皮干細胞HSP70表達及細胞增殖的影響
【摘要】:目的分離、培養(yǎng)并鑒定SD大鼠表皮干細胞;觀察不同溫度加熱對表皮干細胞熱耐受預測因子HSP70表達和細胞增殖的影響。方法體外分離培養(yǎng)大鼠表皮干細胞,用倒置顯微鏡觀察其形態(tài),以角質(zhì)形成細胞作為對照;采用細胞免疫熒光技術(shù)對β1-整合素、干性標志物K19、α6及分化標志物K10進行鑒定;實驗對37、41、43、45、47、49℃熱處理的表皮干細胞采用MTT法測定細胞吸光度值,計算細胞存活率;Western blot法測定HSP70表達的變化。結(jié)果分離的細胞體積小,核質(zhì)比大,集落生長,呈典型的鋪路石樣結(jié)構(gòu);實驗組細胞干性標志物K19、β1-整合素及α6呈陽性表達,分化標志物K10表達陰性;隨著溫度升高,細胞HSP70表達增加,于47℃時表達量達到峰值,同時細胞隨溫度升高存活率逐漸降低,于45℃~49℃時降低幅度下降成一水平趨勢。結(jié)論成功建立了SD大鼠表皮干細胞分離、培養(yǎng)方法,升高溫度可抑制表皮干細胞增殖能力,細胞存活率下降,提示HSP70表達增加對表皮干細胞熱損傷可能具有保護作用。
【作者單位】: 南華大學附屬郴州醫(yī)院;第三軍醫(yī)大學創(chuàng)傷燒傷與復合傷國家重點實驗室四室;
【關(guān)鍵詞】: 表皮干細胞 HSP 熱損傷
【基金】:第三軍醫(yī)大學創(chuàng)傷、燒傷與復合傷國家重點實驗室開放基金資助項目(SKLKF201203)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 我國每年各種燒燙傷患者達數(shù)百萬之多,燒傷所浸泡1 minx2次。取背部皮膚,去除皮下筋膜,修剪致的皮膚缺損畸形以及功能障礙已成為危害人民群成條狀(0.5 cmx3.0 cm),表皮面朝上展平皮膚,漂眾健康的多發(fā)常見病,表皮干細胞作為皮膚組織的特浮于0.25%胰酶而表皮不被浸沒,4t過夜消化
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