發(fā)布時間：2017-07-15 12:09

  本文關(guān)鍵詞：雙歧桿菌腸道內(nèi)調(diào)控表達(dá)腸道病毒71型VP1蛋白的實驗研究

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【摘要】：目的構(gòu)建重組腸道病毒71VP1基因雙歧桿菌,制成口服疫苗,用于EV71感染預(yù)防。方法擴(kuò)增EV71病毒VP1基因并將其插入到大腸埃希菌-雙歧桿菌穿梭表達(dá)載體pBBAD/Xs中,構(gòu)建VP1表達(dá)載體(pBBADs-VP1),通過Western blot檢測VP1蛋白在pBBADs-VP1轉(zhuǎn)化菌中的表達(dá)。選取BALB/c小鼠,分為B-VP1組、VP1組、GFP組和生理鹽水組,B-VP1組口服pBBADs-VP1-轉(zhuǎn)化雙岐桿菌,VP1組腹腔注射大腸埃希菌表達(dá)純化的重組VP1蛋白,GFP組口服pBBADs-GFP轉(zhuǎn)化雙岐桿菌,生理鹽水組口服生理鹽水,觀察pBBADs-VP1-轉(zhuǎn)化雙岐桿菌口服免疫對EV71感染的免疫反應(yīng):包括病毒的中和抗體滴度、抗EV71-VP1抗體以及誘導(dǎo)脾臟和淋巴集結(jié)中Th1免疫反應(yīng)。結(jié)果與GFP組及生理鹽水組比較,B-VP1組及VP1組中和抗體滴度及抗EV71-VP1抗體水平,均顯著增加;口服表達(dá)VP1蛋白長雙歧桿菌和注射VP1蛋白都會誘導(dǎo)Th1細(xì)胞因子免疫反應(yīng)(P0.05),表達(dá)VP1蛋白長雙歧桿菌較易誘導(dǎo)局部腸道的Th1模式,而注射VP1蛋白較易誘導(dǎo)全身性免疫。攻毒試驗顯示,VPI和B-VP1組新生鼠攻擊后第15d(劑量1 000LD50)存活率分別為20.00%和16.67%,對照組無小鼠存活。結(jié)論利用長雙歧桿菌表達(dá)VP1蛋白的口服疫苗可能成功激發(fā)針對EV71病毒感染的特異性免疫應(yīng)答。用表達(dá)VP1的重組雙歧桿菌免疫母鼠,可以賦予新生小鼠以保護(hù)。
【作者單位】： 深圳市南山區(qū)人民醫(yī)院;深圳市內(nèi)源性感染診治研究重點實驗室;南方醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 腸道病毒型 VP蛋白 長雙歧桿菌 口服免疫
【基金】：深圳市科技創(chuàng)新委員會項目(No.201001023,201202173)
【分類號】：R373.2
【正文快照】： 腸道病毒71型(EV71)為單鏈RNA病毒,屬微小RNA病毒科(Picornaviridae),腸病毒屬(Entero-virus)。EV71感染引起手足口病[1],脊髓灰質(zhì)炎樣麻痹[1,2]和致命的腦炎與心肺并發(fā)癥[3]。近年來,EV71在一些國家和地區(qū)流行,嚴(yán)重威脅嬰幼兒健康[1~3]。目前尚無有效的抗病毒藥物治療重癥EV7

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：543782