本文關(guān)鍵詞：腺病毒介導(dǎo)Wnt10b基因調(diào)控人BMSCs成骨成脂分化的體外實驗研究

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【摘要】：目的體外實驗研究腺病毒介導(dǎo)Wnt10b基因表達與抑制對人BMSCs(human BMSCs,hBMSCs)成骨成脂分化的調(diào)控。方法取健康成人髂骨骨髓分離培養(yǎng)hBMSCs,取第4代細胞并分為4組:A、B、C組分別加入Wnt10b基因表達腺病毒載體、Wnt10b基因沉默(Wnt10b-shRNA)腺病毒載體和空病毒轉(zhuǎn)染細胞,D組細胞不進行轉(zhuǎn)染作為空白對照組。各組進行成骨、成脂和無誘導(dǎo)培養(yǎng),通過ALP染色、茜素紅染色和油紅O染色檢測Wnt10b對各組成骨成脂分化的影響,通過實時熒光定量PCR檢測成骨和成脂相關(guān)基因表達,Western blot檢測成骨和成脂相關(guān)蛋白表達,了解Wnt10b對hBMSCs成骨成脂轉(zhuǎn)錄和蛋白水平的影響。結(jié)果成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后ALP染色4組均呈陽性,A組呈強陽性,B組染色最弱;茜素紅染色A組出現(xiàn)大量片狀融合褐色礦化結(jié)節(jié),B組見少許點狀褐色礦化結(jié)節(jié),C、D組出現(xiàn)大量點狀褐色礦化結(jié)節(jié)。成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)后油紅O染色B、C、D組呈強陽性表現(xiàn),其中B組最強;A組散在小團狀著色區(qū),數(shù)量較其他組明顯減少。熒光定量PCR和Western blot結(jié)果示:A組成骨轉(zhuǎn)錄因子和蛋白表達高于B、C、D組,B組低于C、D組;而成脂轉(zhuǎn)錄因子和蛋白表達與成骨轉(zhuǎn)錄因子及蛋白表達情況相反。結(jié)論 Wnt10b基因高表達促進hBMSCs向成骨分化,低表達則促進成脂分化。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： Wntb基因 人BMSCs 成骨分化 成脂分化
【分類號】：R363
【正文快照】： MSCs是成骨細胞和脂肪細胞共同的前體細胞[1]。體外研究發(fā)現(xiàn),誘導(dǎo)MSCs成骨分化的因素會抑制其成脂分化[2],這與病理學(xué)及流行病學(xué)發(fā)現(xiàn)的老齡化、骨丟失和骨質(zhì)疏松伴隨骨髓內(nèi)脂肪組織增加一致[3-4]。目前體內(nèi)外實驗均支持“細胞系競爭”的學(xué)說,即骨內(nèi)以犧牲成骨為代價的脂肪細胞

【共引文獻】

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