本文關(guān)鍵詞：大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)與CM-DiI熒光標(biāo)記

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【摘要】：背景:目前,對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、純化和擴(kuò)增還沒有統(tǒng)一的、標(biāo)準(zhǔn)化的方法。CM-DiI作為熒光標(biāo)記物穩(wěn)定、可靠、標(biāo)記率高、標(biāo)記簡(jiǎn)便。目的:建立SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外分離培養(yǎng)及標(biāo)記的方法。方法:取2只體質(zhì)量50-100 g雄性SD大鼠,無菌條件下采集雙側(cè)股骨、脛骨骨髓,用全骨髓貼壁分離法和密度梯度離心法培養(yǎng)出原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,通過及時(shí)、反復(fù)傳代對(duì)細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增純化,在體外用熒光活性染料CM-DiI標(biāo)記第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后作為供體細(xì)胞來源。結(jié)果與結(jié)論:用全骨髓貼壁分離法和密度梯度離心法兩種方法均能成功體外分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,經(jīng)流式細(xì)胞儀分析,培養(yǎng)出的細(xì)胞CD34陽性率為17.5%,CD44陽性率為97.9%、CD90陽性率為91%,與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面抗原一致。但培養(yǎng)出的細(xì)胞數(shù)量全骨髓貼壁分離法明顯多于密度梯度離心法,兩種方法培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活力和增殖能力無明顯差異。CM-DiI能夠成功熒光標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,CM-DiI作為熒光標(biāo)記物穩(wěn)定、可靠、標(biāo)記率高、標(biāo)記簡(jiǎn)便。
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診科;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞示蹤 CM-DiI CD CD CD 細(xì)胞增殖 細(xì)胞培養(yǎng)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞占骨髓有核細(xì)胞的百萬分之一到十萬分之一,故分離高純度并能良好生長(zhǎng)和增殖的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是原代培養(yǎng)的關(guān)鍵性技術(shù)。目前,對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、純化和擴(kuò)增還沒有統(tǒng)一的、標(biāo)準(zhǔn)化的方法[1]。常用從骨髓細(xì)胞中分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的

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