本文關(guān)鍵詞：從MOT、SS及胃腸道ICC細(xì)胞探討柴胡疏肝散促進(jìn)肝郁模型鼠胃腸動(dòng)力作用機(jī)制的研究

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【摘要】：目的：觀察柴胡疏肝散對(duì)肝郁模型鼠胃排空、胃腸激素以及小腸細(xì)胞微結(jié)構(gòu)等的影響,從胃腸激素、ICC細(xì)胞等角度,揭示該方對(duì)肝郁模型鼠胃腸動(dòng)力的藥理學(xué)作用及機(jī)制,揭示中藥從肝治脾整體調(diào)節(jié)的優(yōu)勢所在。方法：1.肝郁大鼠模型的建立：采用包括禁食、禁水、低溫游泳、高溫環(huán)境、水平震蕩、夾尾、晝夜顛倒七種刺激方法,每日隨機(jī)選用一次,造模3周,并測定造模前后大鼠一般情況、體重、進(jìn)食量以及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間用于評(píng)價(jià)造模效果。2.柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠血清MOT、SS及胃排空功能的影響：造模后,按各組劑量每天10 ml·kg-1ig給藥2周,柴胡疏肝散高、低劑量組給藥濃度分別為：21.0,10.5 g·kg-1,嗎丁啉組給藥濃度為：10 mg·kg-1,空白組及造模組均給以等體積生理鹽水。并于造模前、造模后及給藥后分別使用ELISA法測定各組大鼠血清MOT、SS含量,酚紅法測定胃排空率。3.柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠ICC-DMP細(xì)胞的影響：取正常組、造模組、給藥各組大鼠距離幽門1 cm的上段8 cm的小腸組織,沿系膜緣剖開去除內(nèi)容物,固定液中固定后常規(guī)制備電鏡切片,電鏡觀測ICC-DMP的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果：1.實(shí)驗(yàn)一結(jié)果：造模前后,正常組大鼠的一般狀態(tài)較為穩(wěn)定。造模后,造模組大鼠毛發(fā)逐漸轉(zhuǎn)為凌亂干結(jié),活動(dòng)逐漸減少,出現(xiàn)倦怠、乏力、嗜睡等表現(xiàn)；情緒由穩(wěn)定變?yōu)橐着^而低落；進(jìn)食逐漸減少；大便逐漸變軟甚至便溏。造模組強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間顯著延長,與正常組相比,差異顯著(p0.01)。體重方面,正常組大鼠的體重穩(wěn)步增長,而造模組體重增長緩慢甚至出現(xiàn)負(fù)增長,差異顯著(p0.01)且這種改變與性別無關(guān),胃腸激素方面,造模前后對(duì)比,造模各組MOT分泌明顯減少(P0.05)而SS分泌均明顯升高(P0.05)。2.實(shí)驗(yàn)二結(jié)果：造模前后對(duì)比,實(shí)驗(yàn)二結(jié)果與實(shí)驗(yàn)一基本相似,可認(rèn)為造模成功。給藥后,進(jìn)食量方面,給藥組與正常組進(jìn)食量相當(dāng)(P0.05)。且較模型組進(jìn)食量均有增加(P0.05),其中嗎丁啉組日均進(jìn)食量增加更為明顯(P0.01)。體重方面,各組大鼠體重均有回升,尤其以嗎丁啉組回升較快,與造模組相比差異顯著(P0.05)。給予中藥的兩組大鼠,低劑量組體重恢復(fù)速度較慢,然而高劑量組恢復(fù)速度較快。行為學(xué)指標(biāo)方面,造模組不動(dòng)時(shí)間長于空白組(P0.05),而中藥高、低劑量組不動(dòng)時(shí)間均顯著短于造模組及西藥組(P0.05),且中藥組間沒有明顯差異。胃排空方面,正常組及各給藥組胃排空率均高于模型組(P0.05),且柴胡疏肝散低劑量組差異更為明顯(P0.01),而各治療組間差異不顯著(P0.05)。胃腸激素水平方而,造模組MOT分泌雖有所恢復(fù),與空白組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但是總體仍小于空白組,而給藥組MOT水平均高于造模組及空白組(P0.05)。給藥后,與正常組相比,嗎丁啉組血清SS含量降低(P0.05)。與模型組相比,給藥組血清SS含量均有顯著下降(P0.01)。4.實(shí)驗(yàn)三結(jié)果：肝郁證模型組ICC-DMP總體數(shù)目減少,與平滑肌細(xì)胞及神經(jīng)纖維末梢有縫隙連接；細(xì)胞呈多邊形,胞質(zhì)少,線粒體擴(kuò)張、脊斷裂,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,細(xì)胞核內(nèi)常染色質(zhì)豐富。經(jīng)高劑量柴胡疏肝散治療后,ICC-DMP數(shù)量明顯增加,細(xì)胞呈梭形,胞質(zhì)稀少,胞質(zhì)內(nèi)糖原顆粒豐富,部分內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,細(xì)胞核桿狀,異染色質(zhì)豐富,部分線粒體腫脹,但明顯少于造模組。低劑量柴胡疏肝散治療后大鼠小腸ICC-DMP結(jié)構(gòu)改善及數(shù)量恢復(fù)雖不及高劑量組,但已有好轉(zhuǎn)趨勢。嗎丁啉組ICC-DMP結(jié)構(gòu)改善尚不明顯。結(jié)論：1.柴胡疏肝散增加大鼠進(jìn)食量及體重,縮短強(qiáng)迫游泳的不動(dòng)時(shí)間。2.柴胡疏肝散改善肝郁模型大鼠胃腸動(dòng)力的機(jī)制可能是通過上調(diào)血液MOT、SS含量。3.柴胡疏肝散可以一定程度上促進(jìn)模型大鼠小腸ICC-DMP的數(shù)量和形態(tài)的恢復(fù)。
【關(guān)鍵詞】：柴胡疏肝散 慢性不可預(yù)知應(yīng)激 肝郁證 胃動(dòng)素 生長抑素 Cajal間質(zhì)細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R285.5;R-332
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 英文縮略詞表11-12
• 前言12-13
• 第一章 理論研究13-18
• 1. 中醫(yī)對(duì)功能性消化不良的認(rèn)識(shí)13-15
• 1.1 病因病機(jī)認(rèn)識(shí)13-14
• 1.2 辨證分型14-15
• 1.3 治療方法15
• 2. 西醫(yī)學(xué)對(duì)于功能性消化不良的認(rèn)識(shí)15-18
• 2.1 對(duì)病因認(rèn)識(shí)的進(jìn)展15-16
• 2.2 對(duì)發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展16
• 2.3 功能性消化不良的治療16-18
• 第二章 實(shí)驗(yàn)研究18-37
• 第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)一：肝郁證大鼠模型的建立18-23
• 材料與方法18-19
• 1 材料18
• 1.1 動(dòng)物18
• 1.2 儀器18
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑18
• 2. 方法18-19
• 2.1 分組與造模18
• 2.2 取材18
• 2.3 指標(biāo)檢測18
• 2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理18-19
• 結(jié)果19-21
• 3.1 大鼠一般狀態(tài)觀察19
• 3.2 對(duì)行為學(xué)指標(biāo)的影響19
• 3.3 對(duì)大鼠體重變化的影響19-20
• 3.4 對(duì)血清MOT、SS水平的影響20-21
• 討論21-23
• 4.1 肝郁模型制備的原理21-22
• 4.2 肝郁大鼠行為學(xué)指標(biāo)的變化22
• 4.3 肝郁證大鼠胃腸激素的變化22-23
• 第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)二：柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠血清MOT、SS及胃排空功能的影響23-31
• 材料與方法23-24
• 1. 材料23
• 1.1 動(dòng)物23
• 1.2 藥物23
• 1.3 儀器與試劑23
• 2. 方法23-24
• 2.1 分組與造模23-24
• 2.2 取材24
• 2.3 指標(biāo)觀測及方法24
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理24
• 結(jié)果24-29
• 3.1 對(duì)大鼠進(jìn)食量變化的影響24-25
• 3.2 對(duì)大鼠體重變化的影響25-27
• 3.3 對(duì)大鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響27
• 3.4 對(duì)大鼠胃排空的影響27-28
• 3.5 對(duì)大鼠血清MOT的影響28
• 3.6 對(duì)大鼠SS的影響28-29
• 討論29-31
• 4.1 柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠體重變化的影響29
• 4.2 柴胡疏肝散對(duì)大鼠進(jìn)食量的影響29-30
• 4.3 柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠行為學(xué)指標(biāo)的影響30
• 4.4 柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠胃排空率的影響30
• 4.5 柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠血清MOT、SS的影響30-31
• 第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)三：柴胡疏肝散對(duì)肝郁證大鼠ICC-DMP細(xì)胞的影響31-34
• 材料與方法31-32
• 1. 材料31
• 1.1 動(dòng)物31
• 1.2 藥物31
• 1.3 儀器與試劑31
• 2. 方法31-32
• 2.1 分組與造模31
• 2.2 取材31
• 2.3 指標(biāo)觀測31-32
• 結(jié)果32
• 討論32-34
• 第四節(jié) 參考文獻(xiàn)34-37
• 結(jié)語37-38
• 附錄38-44
• 參考文獻(xiàn)42-44
• 攻讀碩士研究生期間獲得的研究成果44-45
• 致謝45-46
• 個(gè)人簡歷46

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