本文關(guān)鍵詞：單增李斯特菌膠體金免疫層析試紙條的研制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的以單增李斯特菌(LM)內(nèi)化素A蛋白(InlA)單克隆抗體為基礎(chǔ),研制其膠體金免疫層析檢測試紙條。方法采用DNAStar軟件對LM inlA全長基因編碼蛋白進(jìn)行抗原表位分析,截取部分inlA基因片段構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒,誘導(dǎo)表達(dá)和純化獲得重組蛋白。以該蛋白免疫BALB/c小鼠,篩選高效分泌抗InlA單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,制備單克隆抗體;以雙抗體夾心的原理研制膠體金免疫層析檢測試紙條,并對其特異性、敏感性、穩(wěn)定性進(jìn)行評價。結(jié)果篩選到2株高效分泌抗InlA單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,抗體屬于IgG1亞類,小鼠腹水抗體效價為1∶64 000;研制的試紙條可與LM發(fā)生陽性反應(yīng),而與非LM李斯特菌、鏈球菌、鼠傷寒沙門菌、大腸桿菌O157∶H7等食源性致病菌均不發(fā)生陽性反應(yīng);LM純培養(yǎng)物敏感性為2.4×105cfu/ml,模擬豬肉樣品敏感性為4.0×106cfu/ml;4℃保存期可達(dá)16周以上。結(jié)論研制的膠體金免疫層析試紙條具有快速、特異、敏感等優(yōu)點(diǎn),可以用于樣品中LM的快速檢測。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)部獸用診斷制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗室;
【關(guān)鍵詞】： 單增李斯特菌 InlA蛋白 單克隆抗體 膠體金免疫層析檢測試紙條 食源性致病菌
【基金】：“十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國家科技計劃課題(2012AA101601) 武漢市科技攻關(guān)計劃(2013020501010172)
【分類號】：R392
【正文快照】： 單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一種重要的人獸共患病原菌,在自然環(huán)境中分布廣泛,易造成食物污染,可引起人的敗血癥、腦膜炎、胃腸炎、肺炎等,病死率高,免疫力低下者(如65歲以上的老人、孕婦及新生兒)更易感染[1-2]。世界衛(wèi)生組織(WHO)將其列為需要重點(diǎn)監(jiān)

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本文編號：510592