免疫磁珠富集與SYB RGreen熒光定量PCR技術(shù)聯(lián)合檢測水體中甲肝病毒
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【摘要】:本實(shí)驗(yàn)旨在建立一種免疫磁珠與SYBR Green熒光定量PCR技術(shù)聯(lián)合檢測水體中甲肝病毒的方法。通過制備特異性甲肝病毒免疫磁珠,優(yōu)化病毒核酸提取方法,建立了免疫磁珠富集病毒和熒光定量PCR檢測水體中甲肝病毒的方法。研究結(jié)果顯示,1mg免疫磁珠與75μg甲肝病毒單克隆抗體偶聯(lián)時(shí),有最大抗體偶聯(lián)量;該偶聯(lián)后的磁珠富集甲肝病毒效率為92.87%。研究結(jié)果還顯示,SYBR Green熒光定量PCR檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好(R~2=0.999),檢測極限低至9.27×10~1拷貝/μL。本研究結(jié)果表明,免疫磁珠與SYBR Green熒光定量PCR技術(shù)結(jié)合,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可信度強(qiáng)、簡便快捷的優(yōu)點(diǎn),本方法對水體中甲肝病毒污染狀況檢測與評價(jià)提供了有力的技術(shù)支持。
【作者單位】: 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物群發(fā)性疾病監(jiān)測和防治研究所;中國科學(xué)院武漢病毒研究所;
【關(guān)鍵詞】: 免疫磁珠 熒光定量PCR 甲肝病毒
【基金】:國家科技支撐計(jì)劃(2013BAK12B05)
【分類號】:X52;R373.2
【正文快照】: 甲肝病毒(Hepatitis A virus,HAV)是一種小共患腸道病毒之一。甲肝病毒高濃度存在于感染者RNA病毒科嗜肝病毒屬的RNA病毒,為常見的人畜的糞便中,早在1973年,Feinslone利用免疫電鏡技 術(shù)在患病者的糞便樣品中觀測到了甲肝病毒[1],它 多功能磁分離器(上海奧潤微納新材料科技有
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中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 姚t,
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