本文關(guān)鍵詞：c-Myc對(duì)誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的誘導(dǎo)效率及全能性影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：該研究探討轉(zhuǎn)錄因子c-Myc對(duì)多能誘導(dǎo)干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPS)誘導(dǎo)效率及形成的iPS克隆全能性的影響。將Yamanaka四因子(Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc,OSKM)和不含c-Myc的三因子(OSK)病毒分別感染OG2小鼠成纖維細(xì)胞(mouse embryo fi broblast,MEF),誘導(dǎo)成為iPS細(xì)胞,通過計(jì)數(shù)iPS克隆形成數(shù)目和流式細(xì)胞儀分析iPS克隆的綠色熒光蛋白(GFP)陽性比例,比較OSKM和OSK誘導(dǎo)iPS的效率。分別挑取三株OSK和OSKM誘導(dǎo)的iPS克隆,采用熒光定量PCR法、堿性磷酸酶(AP)染色法和免疫熒光法檢測(cè)iPS克隆的干性相關(guān)蛋白的表達(dá);采用畸胎瘤實(shí)驗(yàn)、嵌合體形成實(shí)驗(yàn)和四倍體補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)檢測(cè)iPS克隆的全能性。結(jié)果顯示:在該實(shí)驗(yàn)室誘導(dǎo)體系里,OSK病毒感染MEF后形成的iPS克隆數(shù)目明顯增多,GFP陽性克隆的比例增加。OSK和OSKM誘導(dǎo)iPS克隆的干細(xì)胞基本特征,包括形態(tài)、AP染色、干細(xì)胞特異性基因表達(dá)、三胚層形成均沒有明顯差異。然而,OSK誘導(dǎo)iPS克隆在形成嵌合體小鼠的全能性評(píng)估實(shí)驗(yàn)中的陽性比例高于OSKM克隆,且只有OSK克隆株能夠獲得生殖系傳遞小鼠和四倍體補(bǔ)償小鼠。該研究表明,在實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)體系里去除c-Myc的三因子OSK誘導(dǎo)iPS的效率顯著高于OSKM四因子,且三因子誘導(dǎo)iPS克隆具有更好的全能性。
【作者單位】： 上海市信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與疾病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 同濟(jì)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 c-Myc 嵌合體小鼠 四倍體補(bǔ)償小鼠
【基金】：國家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):31071227)資助的課題~~
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells)和胚胎干細(xì)胞同樣具有無限增殖和自我更新的能力,但iPS細(xì)胞避免了胚胎干細(xì)胞存在的倫理等諸多問題,因此是再生醫(yī)學(xué)研究的重大突破。自2006年Yamanaka小組[1]通過共表達(dá)Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四種轉(zhuǎn)錄因子(OSKM)成

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本文編號(hào)：473518