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兔脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)鑒定及體外磁標(biāo)記MR成像

發(fā)布時(shí)間:2017-06-15 05:11

  本文關(guān)鍵詞:兔脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)鑒定及體外磁標(biāo)記MR成像,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的研究兔脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose derived stem cells,ADSCs)的培養(yǎng)鑒定方法,聯(lián)合應(yīng)用超順磁性氧化鐵(superparamagnetic iron oxide particles,SPIO)和多聚賴氨酸(poly-l-lysine,PLL)行體外磁標(biāo)記細(xì)胞,探討磁標(biāo)記示蹤的可行性。方法分離、純化并培養(yǎng)兔ADSCs,流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面抗原CD90、CD44和CD34。應(yīng)用SPIO-PLL標(biāo)記細(xì)胞,普魯士藍(lán)染色和透射電鏡檢測(cè)胞內(nèi)鐵粒子。體外3.0T MR分別對(duì)1×107個(gè)未標(biāo)記ADSCs(空白對(duì)照),經(jīng)25、50、75μg/mL SPIO-PLL分別標(biāo)記的1×107個(gè)細(xì)胞,經(jīng)25μg/mL SPIO-PLL標(biāo)記的1×107個(gè)(標(biāo)記1 d)、1×107個(gè)(標(biāo)記3 d)和5×106個(gè)(標(biāo)記1 d)ADSCs進(jìn)行成像,包括T1WI、T2WI及T*2WI序列,測(cè)量各組的信號(hào)強(qiáng)度和弛豫時(shí)間。結(jié)果第3代ADSCs純度高、排列規(guī)則,細(xì)胞呈漩渦狀,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果示CD44和CD90陽(yáng)性表達(dá)率分別為99.2%、98.7%,CD34表達(dá)陰性。普魯士藍(lán)染色和透射電鏡示胞漿內(nèi)藍(lán)色顆粒,磁標(biāo)記率近100%。MR示隨著SPIO-PLL濃度增高,T*2WI和T2WI序列的信號(hào)強(qiáng)度變化較T1WI明顯。1×107個(gè)ADSCs(標(biāo)記1 d)的信號(hào)強(qiáng)度變化率較1×107個(gè)(標(biāo)記3 d)和5×106個(gè)(標(biāo)記1 d)大,T*2和T2弛豫時(shí)間與T1弛豫時(shí)間相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=161.47,P0.05),但T*2和T2弛豫時(shí)間相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=5.88,P0.05)。結(jié)論通過(guò)分離純化培養(yǎng)可獲得足量的ADSCs,SPIO-PLL能夠有效標(biāo)記ADSCs,體外可行MR細(xì)胞成像,以T*2WI和T2WI序列敏感。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院放射科;
【關(guān)鍵詞】脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 超順磁性氧化鐵 磁標(biāo)記 磁共振成像 體外
【基金】:重慶市自然科學(xué)基金(CSTC2011jjA10082)~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 由椎間盤退變引起的下腰背疼痛是常見(jiàn)的慢性病,目前臨床治療不能從根本上解決病因。椎間盤缺乏神經(jīng)血管,自身無(wú)再生修復(fù)能力[1]。隨著細(xì)胞分子生物學(xué)、基因?qū)W及材料工程學(xué)的迅速發(fā)展,運(yùn)用干細(xì)胞組織工程技術(shù)延緩或逆轉(zhuǎn)退變椎間盤成為可能。脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose derived s

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