目的探討Notch信號通路在糖皮質(zhì)激素影響間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)成骨分化過程中的作用。方法培養(yǎng)MSCs,給予糖皮質(zhì)激素(glucocorticoids, GCs)處理,計算凋亡率,分析細(xì)胞凋亡情況;通過real-time PCR方法,檢測細(xì)胞內(nèi)Notch信號通路靶基因Hes1和成骨相關(guān)基因(ALP,Col1agen1)mRNA的表達(dá);通過Western blot方法檢測Notch信號通路靶基因Hes1和成骨相關(guān)基因蛋白的表達(dá);應(yīng)用茜素紅染色,檢測細(xì)胞內(nèi)成骨鈣化作用。結(jié)果 GCs處理后,凋亡細(xì)胞增加[(80±5.789)vs對照組(60±7.132),P<0.05];MSCs成骨分化相關(guān)基因ALP、Collagen1mRNA和蛋白表達(dá)明顯減低,與對照組相比,P<0.05;茜素紅染色顯示GCs組染色強度與對照組相比顯著降低(P<0.05)。同時,Notch信號通路靶基因Hes1表達(dá)明顯降低(與對照組相比,P<0.05),Notch信號通路表達(dá)明顯受到抑制。激活Notch信號通路,細(xì)胞凋亡百分率降低為72±2.169(...

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和分組
    1.3 檢測指標(biāo)
        1.3.1 細(xì)胞凋亡分析:
        1.3.2 RNA提取和real-time PCR檢測:
        1.3.3 Western blot 蛋白表達(dá)檢測:
        1.3.4 茜素紅染色:
    1.4 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 GCs處理對MSCs凋亡的影響。
    2.2 GCs處理對MSCs中Notch信號通路表達(dá)的影響
    2.3 GCs處理對MSCs成骨分化的影響
3 討論



本文編號：3976322