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pCol(24-38)誘導(dǎo)抗腎小球基底膜腎病大鼠模型的建立

發(fā)布時間:2024-03-28 04:12
  目的以含大鼠Ⅳ型膠原α3鏈的非膠原區(qū)[α3(Ⅳ)NC1]的多肽pCol(24-38)作為抗原建立抗腎小球基底膜(GBM)病大鼠模型,研究抗GBM病的發(fā)病機制。方法選擇雄性WKY大鼠20只(8~10周齡),體重120~150g,隨機分為對照組和抗GBM病模型組,每組10只?笹BM病模型組使用多肽pCol(24-38)作為抗原,對照組使用多肽pCol(38-52)作為抗原,兩組均用完全弗氏佐劑乳化后,于大鼠背部皮下三點注射免疫。免疫后每周定時收集24h尿,測尿蛋白含量,所有動物在免疫后49d處死,取血清,采用肌氨酸氧化酶法檢測血清肌酐,脲酶法檢測尿素氮濃度,并用間接ELISA法檢測血清抗pCol(24-38)抗體相對滴度。取腎臟組織,一部分石蠟切片后行PAS染色及免疫組化染色,另一部分經(jīng)OCT包埋冷凍切片后用直接免疫熒光法檢測IgG在腎小球的沉積情況。結(jié)果與對照組比較,抗GBM病模型組的24h尿蛋白含量自第4周開始明顯升高[(52.27±10.50)mg/24h vs.(4.87±0.64)mg/24h,P<0.001],之后逐漸上升,至第7周,抗GBM病模型組的24h尿蛋白含量仍...

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 多肽合成及免疫
    1.3 生化指標(biāo)檢測及腎臟病理檢測
        1.3.1 尿蛋白、血清肌酐及尿素氮檢測
        1.3.2 腎小球異常評定
        1.3.3 巨噬細胞浸潤情況檢測
        1.3.4 間接ELISA法檢測血清中抗GBM抗體的水平
        1.3.5評估Ig G在GBM上的沉積情況
    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 兩組2 4 h尿蛋白定量比較
    2.2 兩組血清肌酐及尿素氮水平比較
    2.3 病理學(xué)觀察
        2.3.1 腎臟與腎小球異常
        2.3.2 腎小球巨噬細胞浸潤情況
    2.4 抗體應(yīng)答的評估
    2.5 IgG在GBM上的沉積情況
3 討論



本文編號:3940982

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