目的:通過免疫、融合、純化獲得了抗中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)的特異性單克隆抗體,并建立了膠體金試紙條的檢測(cè)。方法:本研究篩選得到5株抗NGAL的單克隆抗體,通過配對(duì)測(cè)試,1B4和2C6能用于雙抗夾心膠體金試紙條的制備。以重組hr NGAL為檢測(cè)對(duì)象,對(duì)本試紙條的靈敏度、重復(fù)性、穩(wěn)定性進(jìn)行了全面評(píng)價(jià)。結(jié)果:本試紙條的靈敏度為5 ng/ml,重復(fù)性和穩(wěn)定性良好,對(duì)臨床樣本的檢測(cè)與臨床結(jié)果一致。結(jié)論:本研究建立的NGAL免疫膠體金檢測(cè)方法,靈敏度高,檢測(cè)時(shí)間短,成本低,為普及臨床檢測(cè)早期腎損傷具有重要意義。

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【部分圖文】：

圖1試紙條組成示意圖Fig．1Diagramofpaperstripcomposition

圖2膠體金溶液400～600nm掃描圖譜Fig．2Scanningmapofcolloidalgoldsolutionat400－

圖3金標(biāo)NGAL抗體2C6偶聯(lián)物400～600nm掃描圖譜Fig．3Scanningmapofanti-NGALantibody2C6

圖4膠體金透射電鏡圖Fig．4Transmissionelectronmicroscopyofcolloidalgold

;2C6效價(jià)為1∶5.12×105，親和力達(dá)到4×108，亞型為IgM。2.2金標(biāo)NGAL抗體2C6偶聯(lián)物的質(zhì)量鑒定2.2.1紫外-可見分光光度儀鑒定結(jié)果圖2、圖3分別為膠體金粒子和金標(biāo)NGAL抗體2C6偶聯(lián)物在400～600nm波段內(nèi)經(jīng)紫外-可見分光光度計(jì)掃描的結(jié)果，膠體金粒子....

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