目的探討Mex3C-1對卡巴膽堿誘導(dǎo)的Fos表達(dá)的影響。方法將具有可持續(xù)表達(dá)人Mex3C-1序列的質(zhì)粒pLV-CMV-Mex3C (OE)在HEK293T細(xì)胞中包裝成慢病毒載體,同時(shí)制備非特異性對照(NC)CmiR0001-MR03的慢病毒載體,分別感染人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y,經(jīng)嘌呤霉素篩選后得到穩(wěn)定高表達(dá)Mex3C-1和陰性對照細(xì)胞系,用Real time PCR和Western blot方法檢測Mex3C-1的基因和蛋白表達(dá)效果。之后用卡巴膽堿誘導(dǎo)Fos表達(dá),在誘導(dǎo)0、30、60、90和120min后分別提取mRNA,采用Real time PCR方法檢測Fos mRNA的相對表達(dá)量。結(jié)果 Real time PCR檢測結(jié)果顯示,OE組的Mex3C-1 mRNA的相對表達(dá)量(21.11±0.60)高于NC組(1.03±0.13)(t=32.63,P=0.000)。Western blot結(jié)果顯示,在82kDa處OE組的Mex3C-1蛋白表達(dá)量高于NC組(P<0.001)。Real time PCR檢測不同干預(yù)時(shí)間兩組Fos mRNA,除0min外各個(gè)時(shí)間點(diǎn)OE組均高...

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圖1pLV-CMV-Mex3C和CmiR0001-MR03質(zhì)粒圖譜

圖3Mex3C-1過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞系Mex3C-1蛋白表達(dá)量，計(jì)x3C同表

與NC組比較*P<0.01（n=3）圖3Mex3C-1過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞系Mex3C-1蛋白表達(dá)量Kit顯影試劑盒曝光成像。隨后用洗膜液洗去抗體，重新孵育一抗β-actin鼠抗單克隆抗體（1∶5000），二抗胎�？故驢RP抗體（1∶5000）重復(fù)上述步驟，對內(nèi)參蛋白曝光成像....

圖2Mex3C-1過表達(dá)SH-SY5Y細(xì)胞系Mex3C-1mRNA的相對表達(dá)量

時(shí)間點(diǎn)Mex3C-1高表達(dá)的OE組與陰性對照NC組相比，F(xiàn)osmRNA表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=287.069，P=0.000），且過表達(dá)OE組與對照NC組的五個(gè)時(shí)間點(diǎn)中均在加入卡巴膽堿誘導(dǎo)60min時(shí)最高，其中于30min和60min時(shí)OE組的表達(dá)量約為NC組的2倍，且除0m....

圖4不同干預(yù)時(shí)間兩組SH-SY5Y細(xì)胞株的FosmRNA表達(dá)量比較

tal.Mex3cmutationreducesadiposityandincreasesenergyexpenditure［J］.MolCellBiol，2012，32（21）:4350-4362.［4］HanC，JiaoY，ZhaoQ，etal.Mex3cmutationre....

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