目的探討Mex3C-1對卡巴膽堿誘導的Fos表達的影響。方法將具有可持續(xù)表達人Mex3C-1序列的質(zhì)粒pLV-CMV-Mex3C (OE)在HEK293T細胞中包裝成慢病毒載體,同時制備非特異性對照(NC)CmiR0001-MR03的慢病毒載體,分別感染人神經(jīng)母細胞瘤細胞SH-SY5Y,經(jīng)嘌呤霉素篩選后得到穩(wěn)定高表達Mex3C-1和陰性對照細胞系,用Real time PCR和Western blot方法檢測Mex3C-1的基因和蛋白表達效果。之后用卡巴膽堿誘導Fos表達,在誘導0、30、60、90和120min后分別提取mRNA,采用Real time PCR方法檢測Fos mRNA的相對表達量。結果 Real time PCR檢測結果顯示,OE組的Mex3C-1 mRNA的相對表達量(21.11±0.60)高于NC組(1.03±0.13)(t=32.63,P=0.000)。Western blot結果顯示,在82kDa處OE組的Mex3C-1蛋白表達量高于NC組(P<0.001)。Real time PCR檢測不同干預時間兩組Fos mRNA,除0min外各個時間點OE組均高...

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圖1pLV-CMV-Mex3C和CmiR0001-MR03質(zhì)粒圖譜

圖3Mex3C-1過表達SH-SY5Y細胞系Mex3C-1蛋白表達量，計x3C同表

與NC組比較*P<0.01（n=3）圖3Mex3C-1過表達SH-SY5Y細胞系Mex3C-1蛋白表達量Kit顯影試劑盒曝光成像。隨后用洗膜液洗去抗體，重新孵育一抗β-actin鼠抗單克隆抗體（1∶5000），二抗胎�？故驢RP抗體（1∶5000）重復上述步驟，對內(nèi)參蛋白曝光成像....

圖2Mex3C-1過表達SH-SY5Y細胞系Mex3C-1mRNA的相對表達量

時間點Mex3C-1高表達的OE組與陰性對照NC組相比，F(xiàn)osmRNA表達量差異有統(tǒng)計學意義（F=287.069，P=0.000），且過表達OE組與對照NC組的五個時間點中均在加入卡巴膽堿誘導60min時最高，其中于30min和60min時OE組的表達量約為NC組的2倍，且除0m....

圖4不同干預時間兩組SH-SY5Y細胞株的FosmRNA表達量比較

tal.Mex3cmutationreducesadiposityandincreasesenergyexpenditure［J］.MolCellBiol，2012，32（21）:4350-4362.［4］HanC，JiaoY，ZhaoQ，etal.Mex3cmutationre....

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