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JWA與α-微管蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-08 05:50
  人類疾病的發(fā)生往往由遺傳因素和環(huán)境因素相互作用決定的。機(jī)體暴露于不同環(huán)境因素(應(yīng)激因子)時(shí),可在分子、細(xì)胞和整體等多個(gè)水平和層次作出相應(yīng)的應(yīng)答反應(yīng),啟動(dòng)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路以及神經(jīng)-體液-內(nèi)分泌等調(diào)節(jié)機(jī)制,通過改變一系列基因的表達(dá)水平以及神經(jīng)遞質(zhì)和激素等釋放機(jī)制,最終使細(xì)胞、組織器官乃至整個(gè)機(jī)體在各種生理、生化功能和協(xié)調(diào)功能等方面獲得新的平衡,從而在一定限度內(nèi)維持機(jī)體正常的生命活動(dòng)。探討基因與環(huán)境的相互作用及其規(guī)律,有助于進(jìn)一步理解和認(rèn)識(shí)環(huán)境因素導(dǎo)致疾病的分子機(jī)制,從而為從分子水平上構(gòu)建環(huán)境因素致機(jī)體損傷的預(yù)警體系提供科學(xué)依據(jù)。1998年,周建偉等從培養(yǎng)的原代人的氣管和支氣管上皮細(xì)胞中,利用差異顯示高通量篩選技術(shù),分離克隆了一個(gè)在生物進(jìn)化上保守、參與調(diào)節(jié)細(xì)胞分化和凋亡的新基因JWA,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),該基因編碼一種新的細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白。本課題組隨后用多種分子和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手段證實(shí)JWA蛋白與微管蛋白β亞單位緊密結(jié)合,在細(xì)胞內(nèi)與其分布基本平行,并在對(duì)環(huán)境物理化學(xué)因素的應(yīng)答(聚合或解聚)中表現(xiàn)出與微管(β亞單位)同步的動(dòng)力學(xué)變化,并可能參與細(xì)胞有絲分裂過程。JWA基因受多種分化...

【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2冰上處理PC12細(xì)胞不同時(shí)間后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情況(xl000)

圖2冰上處理PC12細(xì)胞不同時(shí)間后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情況(xl000)

用熒光顯微鏡對(duì)JWA蛋白在PC12細(xì)胞內(nèi)的分布進(jìn)行了觀察.結(jié)果顯示,冰上處理PC12細(xì)胞不同時(shí)間(圖2),JWA蛋白和a一微管蛋白均發(fā)生不同程度的解聚;冰上處理PC12細(xì)胞Zh,37℃恢復(fù)不同時(shí)間后(圖3),J認(rèn)錢蛋白和a一微管蛋白均逐步聚合,表明在微管聚合和解聚的過程中,JWA....


圖4J認(rèn)叭蛋白和a一微管蛋白在PC12細(xì)胞有絲分裂過程

圖4J認(rèn)叭蛋白和a一微管蛋白在PC12細(xì)胞有絲分裂過程

圖2冰上處理PC12細(xì)胞不同時(shí)間后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情況(xl000)(a)試e)對(duì)照組,(d)代幻處理10min,(g)~(i)處理30min,Q)以l)處理60而n.(a),(d),(g),臼)羅丹明標(biāo)記a一微管蛋白(紅色):(b),(e),(h),(k)F一TC標(biāo)....


圖3PC12細(xì)胞冰上冷處理Zh后再37℃恢復(fù)不同時(shí)間后微管和JWA蛋白聚合情況(x1000)

圖3PC12細(xì)胞冰上冷處理Zh后再37℃恢復(fù)不同時(shí)間后微管和JWA蛋白聚合情況(x1000)

圖2冰上處理PC12細(xì)胞不同時(shí)間后a一微管蛋白和JWA蛋白解聚情況(xl000)(a)試e)對(duì)照組,(d)代幻處理10min,(g)~(i)處理30min,Q)以l)處理60而n.(a),(d),(g),臼)羅丹明標(biāo)記a一微管蛋白(紅色):(b),(e),(h),(k)F一TC標(biāo)....


圖5有絲分裂紡錘體形成期PC12細(xì)胞的激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果

圖5有絲分裂紡錘體形成期PC12細(xì)胞的激光共聚焦顯微鏡觀察結(jié)果

為進(jìn)一步闡明JWA蛋白在有絲分裂紡錘體形成期的分布特征,用激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行觀察.結(jié)果顯示,在有絲分裂紡錘體形成期(圖5),完全解聚的a一微管蛋白和部分解聚的J從rA蛋白共同形成紡錘體,部分JWA蛋白分布在染色體的周圍,與免疫熒光的結(jié)果一致.以上結(jié)果說明在間期細(xì)胞中,JWA蛋白....



本文編號(hào):3922102

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