目的：設(shè)計并合成含非甲基化胞嘧啶和鳥嘌呤二核苷酸的寡聚脫氧核糖核苷酸(CpG-ODN)，以期篩選出對新生兒臍血單個核細胞免疫刺激作用較強的CpG-ODN；觀察不同劑量CPG-1826(5’-TCCATGACGTTCCTGACGTT-3’)輔助乙肝疫苗免疫孕鼠及仔鼠的作用。 方法：設(shè)計合成17條CpG-ODN，采用CpG-ODN刺激足月兒臍血單個核細胞，通過四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色(MTT)法初步篩選CpG-ODN；應(yīng)用RT-PCR法檢測CpG-ODN刺激單個核細胞后Toll樣受體9(TLR-9)的mRNA表達情況，進一步驗證其免疫刺激作用。選擇CpG-1826(不同劑量)作為乙肝疫苗佐劑輔助免疫孕鼠，用ELISA方法檢測孕鼠和仔鼠血清乙肝表面抗體(HBsAb)水平，并觀察仔鼠存活數(shù)量和生長發(fā)育指標的變化。 結(jié)果：篩選出2條對新生兒臍血單個核細胞具有明顯免疫刺激作用的硫代修飾CpG-ODN，即CpG-1：5’-TCGCGTCGTCGTCGTCGTCGTCGT-3’和CpG-6：5’-GACGTTCGAACGTCGACGTA-3’。MTT法測出CpG-1和CpG-6的吸...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

本文編號：3878418