目的：設(shè)計(jì)并合成含非甲基化胞嘧啶和鳥嘌呤二核苷酸的寡聚脫氧核糖核苷酸(CpG-ODN)，以期篩選出對(duì)新生兒臍血單個(gè)核細(xì)胞免疫刺激作用較強(qiáng)的CpG-ODN；觀察不同劑量CPG-1826(5’-TCCATGACGTTCCTGACGTT-3’)輔助乙肝疫苗免疫孕鼠及仔鼠的作用。 方法：設(shè)計(jì)合成17條CpG-ODN，采用CpG-ODN刺激足月兒臍血單個(gè)核細(xì)胞，通過四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色(MTT)法初步篩選CpG-ODN；應(yīng)用RT-PCR法檢測(cè)CpG-ODN刺激單個(gè)核細(xì)胞后Toll樣受體9(TLR-9)的mRNA表達(dá)情況，進(jìn)一步驗(yàn)證其免疫刺激作用。選擇CpG-1826(不同劑量)作為乙肝疫苗佐劑輔助免疫孕鼠，用ELISA方法檢測(cè)孕鼠和仔鼠血清乙肝表面抗體(HBsAb)水平，并觀察仔鼠存活數(shù)量和生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)的變化。 結(jié)果：篩選出2條對(duì)新生兒臍血單個(gè)核細(xì)胞具有明顯免疫刺激作用的硫代修飾CpG-ODN，即CpG-1：5’-TCGCGTCGTCGTCGTCGTCGTCGT-3’和CpG-6：5’-GACGTTCGAACGTCGACGTA-3’。MTT法測(cè)出CpG-1和CpG-6的吸...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

本文編號(hào)：3878418