目的：惡性淋巴瘤一直是病理診斷的難點(diǎn)。PCR以其快速、靈敏、易于操作等優(yōu)點(diǎn)成為眾多領(lǐng)域的首選技術(shù)。近年來，PCR檢測基因重排已經(jīng)成為淋巴瘤診斷不可缺少的手段。然而，假陰性一直是困擾PCR結(jié)果的問題之一。尤其是由于PCR抑制物的存在，常常導(dǎo)致PCR出現(xiàn)假陰性結(jié)果，影響淋巴瘤的正確診斷。目前，關(guān)于抑制物問題，國內(nèi)尚未見系統(tǒng)研究。因此，如何檢出DNA模板中抑制物的存在，通過必要的方法使之去除，同時(shí)探究導(dǎo)致PCR假陰性的其他因素，改進(jìn)固定、DNA提取以及PCR反應(yīng)中的不適環(huán)節(jié)，從而提高基因重排的陽性率，成為本課題研究的重點(diǎn)內(nèi)容。 方法：(1)構(gòu)建一含有β-globin基因片段的重組質(zhì)粒，作為檢測DNA提取物中是否含有PCR抑制物的內(nèi)對(duì)照，在PCR反應(yīng)中作為目的基因擴(kuò)增的模板。選取以淋巴組織為主的新鮮及石蠟組織進(jìn)行分組，有目的地對(duì)新切蠟片和陳舊蠟片設(shè)立對(duì)照，常規(guī)PCR篩查陰性標(biāo)本，加入內(nèi)對(duì)照體系檢測抑制作用的有無。(2)以淋巴瘤細(xì)胞系DG75細(xì)胞DNA作為PCR反應(yīng)的模板，選擇固定、包埋、HE染色以及消化裂解法、酚／氯仿抽提法提取DNA過程中所用化學(xué)試劑10％福爾馬林，95％乙醇，二甲苯...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞（Abbreviation）
中文摘要（Abstract in Chinese）
英文摘要（Abstract in English）
前言（Preface）
第一部分： 福爾馬林固定石蠟包埋組織中PCR抑制物的初步探究（A Tentative Study of Inhibitors in PCR about Formalin Fixed Paraffin-Embedded Tissues）
    材料與方法（Materials And Methods）
    結(jié)果（Results）
    討論（Discussion）
第二部分： 影響PCR部分因素分析與抑制物去除的方法研究（Analysis of Partial Factors Influencing PCR And Methodological Study of Removing of Inhibitors in PCR）
    材料與方法（Materials And Methods）
    結(jié)果（Results）
    討論（Discussion）
全文小結(jié)（A Brief Sum-up）
參考文獻(xiàn)（References）
綜述（Summary）
    參考文獻(xiàn)（References）
論文情況（About Treatise）
致謝（Acknowledgment）



本文編號(hào)：3826725