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生物活性短肽RGD的合成及其在PET表面接枝方法的研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-03 15:21
  生物材料在人類的疾病治療與康復(fù)中起著重要的作用。心血管系統(tǒng)的疾病對生物材料的要求較高。傳統(tǒng)的人造心血管材料在應(yīng)用中不同程度發(fā)生過凝血、補(bǔ)體激活等反應(yīng),直接或間接地導(dǎo)致血栓的形成,最終導(dǎo)致植入物的失敗甚至產(chǎn)生并發(fā)癥危及患者的生命。因此,改善心血管材料的血液相容性,一直是生物材料研究的重要課題。 RGD是大多數(shù)細(xì)胞表面粘附分子能識(shí)別的配體上的最小氨基酸序列,將RGD序列結(jié)合到材料表面上,來自細(xì)胞膜表面的整合素(Integrin)與材料表面的RGD通過配體一受體的結(jié)合,能在一定程度上促進(jìn)細(xì)胞在材料表面的粘附、鋪展、生長,最終融合成層。實(shí)現(xiàn)在材料表面形成具生物活性的細(xì)胞層,提高生物材料血液相容性。 本論文是國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目:“高分子材料表面細(xì)胞可識(shí)別分子模型及內(nèi)皮化機(jī)理的研究”的一部分,即在高分子材料表面共價(jià)引入人工合成的短肽RGD以達(dá)到讓內(nèi)皮細(xì)胞與之特異結(jié)合并得到更加牢固內(nèi)皮化表面的目的。 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了甘氨酸、天冬氨酸、精氨酸三種氨基酸的保護(hù);RGD三肽的液相合成與純化;活性基團(tuán)-COOH的引入和RGD的接枝;材料的內(nèi)皮細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)的研究等。對保護(hù)的氨基酸產(chǎn)物用薄層...

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
課題設(shè)計(jì)
第1章 短肽的合成
    1.1 試劑儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)部分
        1.2.1 氨基酸的保護(hù)
            1.2.1.1 精氨酸的保護(hù)
            1.2.1.2 甘氨酸的保護(hù)
            1.2.1.3 天冬氨酸的保護(hù)
        1.2.2 RGD的合成
            1.2.2.1 二肽的制備
            1.2.2.2 三肽的制備
            1.2.2.3 三肽的純化
    1.3 結(jié)果與討論
        1.3.1 保護(hù)氨基酸的分析
            1.3.1.1 產(chǎn)率、熔點(diǎn)測試和旋光度分析
            1.3.1.2 薄層色譜(TLC)分析
            1.3.1.3 紅外圖譜分析
        1.3.2 RGD液相合成產(chǎn)物的分析
            1.3.2.1 產(chǎn)率、熔點(diǎn)測試和旋光度分析
            1.3.2.2 薄層色譜(TLC)分析
            1.3.2.3 氨基酸分析
            1.3.2.4 紅外圖譜分析
第2章 PET膜表面接枝短肽
    2.1 試劑儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 PET膜表面接口的引入
            2.2.1.1 PET膜的預(yù)處理
            2.2.1.2 羧基的引入
        2.2.2 PET膜表面接枝RGD
            2.2.2.1 EDC偶合接枝
            2.2.2.2 DCC偶合接枝
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 PET表面接口的引入
            2.3.1.1 接觸角分析
        2.3.2 PET膜表面接枝RGD
            2.3.2.1 XPS分析
            2.3.2.2 RGD接枝率的計(jì)算
第3章 PET膜表面接枝短肽的生物活性檢測
    3.1 試劑儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞種植實(shí)驗(yàn)
            3.3.1.1 光鏡分析
            3.3.1.2 電鏡分析
        3.3.2 PET膜接枝與內(nèi)皮細(xì)胞種植實(shí)驗(yàn)結(jié)果綜合分析
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào):3806958

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