甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein，AFP)是個(gè)70kDa的糖蛋白，在胎兒期由胎肝大量合成，在出生后則表達(dá)急劇下降。由于甲胎蛋白在原發(fā)性肝癌中也有高表達(dá)，既往多將甲胎蛋白用于肝癌的早期診斷和病情監(jiān)測(cè)。最近研究表明，甲胎蛋白有著復(fù)雜的生物學(xué)功能，具有既能抑制免疫功能間接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)又能直接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的雙重作用。同時(shí)，甲胎蛋白多肽片斷在和MHC分子結(jié)合后能被細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)所識(shí)別。因此，作為原發(fā)性肝癌的腫瘤相關(guān)性抗原(TAA)，甲胎蛋白完全有可能充當(dāng)肝癌免疫治療的靶分子。但從人血中提取純化甲胎蛋白的量小且成本昂貴。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)大腸桿菌等基因工程菌獲得重組甲胎蛋白，為進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)甲胎蛋白抗腫瘤奠定了基礎(chǔ)。 1．人AFP基因的獲取 用Trizol從人胎肝組織提取mRNA，再逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。設(shè)計(jì)并合成AFP1、AFP2、AFP3三對(duì)基因引物，兩端設(shè)計(jì)與載體多克隆位點(diǎn)匹配的酶切位點(diǎn)BamH Ⅰ、Hind Ⅲ，以cDNA為模板分別作PCR，分別獲取AFP1、AFP2、AFP3基因片段。各PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度：AFP1為588bp；AFP2為678bp；AF...

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 論文正文 人甲胎蛋白基因原核克隆和表達(dá)
    前言
    實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
四、 綜述 腫瘤疫苗臨床研究進(jìn)展
五、 致謝



本文編號(hào)：3797450