目的:建立一種快速、大量培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bMSCs)及快速、大量成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)人bMSCs成為成骨細(xì)胞的方法,以滿足組織工程技術(shù)治療大段骨缺損對(duì)細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量的需要。 方法:1. 利用微載體培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞:將普通培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的第3代人bMSCs分為兩部分,一部分1×107個(gè)采用微載體培養(yǎng),另一部分繼續(xù)采用普通培養(yǎng)瓶培養(yǎng),分別觀察細(xì)胞增殖情況,作出生長(zhǎng)曲線,比較兩種方法細(xì)胞增殖速度 (細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)/培養(yǎng)天數(shù))。 2. 利用微載體法成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)bMSCs:將普通培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的第3代人bMSCs采用攪拌式生物反應(yīng)器和微載體成骨誘導(dǎo)培養(yǎng),觀察細(xì)胞增殖情況,作出生長(zhǎng)曲線,與普通成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)法比較細(xì)胞增殖速度。分別于培養(yǎng)的第2,4,6,8,10,12,14d檢測(cè)誘導(dǎo)細(xì)胞的ALP活性,并與普通成骨誘導(dǎo)方法進(jìn)行對(duì)比,作出ALP活性曲線。最后進(jìn)行細(xì)胞ALP染色、Ⅰ型膠原、骨鈣素的免疫組化染色,觀察所培養(yǎng)細(xì)胞的成骨細(xì)胞表型的表達(dá)。 結(jié)果:1. 利用微載體培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞:微載體法接種24h后約87.1%的bMSCs細(xì)胞貼附于微載體并鋪展,3d后生長(zhǎng)加速,約8⁹天后細(xì)胞...

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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論文正文 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的微載體培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)
    前 言
    第一部分 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的微載體培養(yǎng)
        前 言
        材料和方法
        結(jié) 果
        討 論
        參考文獻(xiàn)
    第二部分 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的微載體成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)
        前 言
        材料和方法
        結(jié) 果
        討 論
        參考文獻(xiàn)
    全文結(jié)論
    致 謝
    照 片
文獻(xiàn)綜述一 生物反應(yīng)器在組織工程學(xué)中的應(yīng)用及其前景
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述二 骨組織工程中的種子細(xì)胞
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3789110