目的：研究培養(yǎng)上清及腹水中乙酰膽堿酯酶抗獨(dú)特型抗體的酶活性為臨床有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的治療提供一條新途徑。 方法：以乙酰膽堿酯酶(AchE)作為抗原免疫動(dòng)物，制備Ache的單克隆抗體；AchE的單克隆抗體是識(shí)別乙酰膽堿酯酶活性中心的單抗，Ache單抗是一種IgG1抗體，先用胃蛋白酶酶切，然后采用SPA親和層析柱進(jìn)行提取純化，利用木瓜蛋白酶酶切抗體，獲得純化的單抗Fab 段(3F3)；采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)測(cè)定Fab片段的活性；再以3F3作為抗原，免疫小鼠，制備抗3F3獨(dú)特型抗體；通過(guò)ELISA法研究該單抗的乙酰膽堿酯酶活性。檢測(cè)結(jié)果組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)。 結(jié)果：1．AchE 3F3 Fab具有結(jié)合抗原(AchE)活性和良好的免疫原性。2．乙酰膽堿酯酶抗體酶具有乙酰膽堿酯酶活性。3。不同稀釋度4B9和2B1腹水中單克隆抗體量有明顯差異，組間比較P＜0.05，P＜0.01，差異有顯著性。 結(jié)論：1．乙酰膽堿酯酶(AchE)具有良好的抗原性，可以以此為抗原制備單克隆抗體。2．乙酰膽堿酯酶單抗可經(jīng)胃蛋白酶水解成為(Fab’)2及Fc’(Fab’)2可作為抗...

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
引言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
附表
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3776055