miR1-2誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化過程中的Wnt/β-catenin信號通路
發(fā)布時間:2022-12-24 12:37
背景:骨髓間充質(zhì)干細胞具有向心肌細胞分化的潛能,但其分化率較低,且其分化機制尚不完全明確。目的:探討miR1-2在小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分化成心肌樣細胞中的作用,揭示此過程中涉及的信號通路。方法:用miR1-2和5-氮雜胞嘧啶處理小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞。通過q PCR檢測心肌細胞標(biāo)志物GATA4在骨髓間充質(zhì)干細胞中的表達。流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡率,并通過測定該信號通路的上游蛋白評價Wnt/β-catenin信號通路的活性。結(jié)果與結(jié)論:(1)miR1-2模擬物轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細胞24 h后,miR1-2在骨髓間充質(zhì)干細胞中的表達顯著增加。miR-2模擬物處理48 h后,骨髓間充質(zhì)干細胞的凋亡率無顯著差異;(2)轉(zhuǎn)染miR1-2模擬物48 h后,與對照組相比,GATA4的表達隨著時間的延長顯著增加,處理72 h后,這些基因在miR1-2組中的表達顯著高于5-氮雜胞嘧啶組和對照組;(3)與miR1-2-mimics-NC相比,用miR1-2模擬物處理后,β-catenin和Wnt11的m RNA和蛋白相對表達均顯著增加,而添加Wnt/β-catenin信號通路抑制劑LGK-974后,β-cate...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
文章快速閱讀:
文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 設(shè)計
1.2 時間及地點
1.3 材料
1.3.1 實驗動物
1.3.2 實驗主要儀器與試劑
1.4 方法
1.4.1 骨髓間充質(zhì)干細胞的分離和體外培養(yǎng)[21]
1.4.2骨髓間充質(zhì)干細胞轉(zhuǎn)染
1.4.3 細胞凋亡測定
1.4.4 Real-time PCR檢測GATA4、Wnt11和β-catenin的mRNA表達
1.4.5 Western blot法檢測GATA4蛋白的表達
1.5 主要觀察指標(biāo)
1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
2.1 5-氮雜胞嘧啶和miR1-2處理的骨髓間充質(zhì)干細胞中miR1-2的表達水平
2.2 5-氮雜胞嘧啶和miR-1模擬物對骨髓間充質(zhì)干細胞凋亡的影響
2.3 miR1-2的高度表達誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞中心臟特異性基因的表達
2.4 高表達miR1-2激活Wnt/β-catenin信號通路
2.5 miR1-2通過Wnt/β-catenin信號傳導(dǎo)激活誘導(dǎo)心肌細胞分化
3 討論Discussion
【參考文獻】:
期刊論文
[1]微小RNA參與心肌缺血再灌注損傷的作用機制及研究進展[J]. 王穎,王雷. 心血管病學(xué)進展. 2017(04)
[2]Wnt和Notch通路在老齡個體骨髓間充質(zhì)干細胞成骨中的調(diào)控[J]. 張建康,衛(wèi)俊俊,唐曌隆,余云波,敬偉. 國際口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(04)
[3]microRNA-184在小兒先天性心臟病中的表達及其與心肌細胞的關(guān)系[J]. 陳宏,陳群,齊鑫,于婷婷,吳士明,蘇玉明. 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2017 (01)
[4]大鼠脂肪干細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞向內(nèi)皮分化的能力比較[J]. 范麗君,肖倩蓉,林凱桑,王思妤,李章芳,李晨鐘,張彤,韓亞娟,沈潔. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(09)
[5]microRNA-34a在肺癌細胞凋亡中的作用[J]. 金向宇,洪衛(wèi). 中華全科醫(yī)學(xué). 2016(06)
[6]胚胎干細胞對孕鼠缺血受損心肌的修復(fù)作用[J]. 王宏茂,邱彬,鄧然,王超,雍偉東,石琳. 中國實驗動物學(xué)報. 2016(02)
[7]MicroRNA-146a對人骨髓間充質(zhì)干細胞分化能力的影響[J]. 葉勖,王興兵,汪健,明靜. 中國實驗血液學(xué)雜志. 2016(02)
[8]骨髓間充質(zhì)干細胞通過血管生成作用治療慢性腎疾病的研究進展[J]. 賈曉靜,韓艷,潘晉兵,崔建軍. 國際泌尿系統(tǒng)雜志. 2016 (02)
[9]GATA-4在心肌損傷修復(fù)中的作用機制研究進展[J]. 賀繼剛,嚴(yán)丹,王平,李洪榮. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(22)
[10]誘導(dǎo)性多潛能干細胞在心血管疾病中的應(yīng)用[J]. 鄒琪,張新超. 中國心血管雜志. 2015(04)
本文編號:3726155
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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 設(shè)計
1.2 時間及地點
1.3 材料
1.3.1 實驗動物
1.3.2 實驗主要儀器與試劑
1.4 方法
1.4.1 骨髓間充質(zhì)干細胞的分離和體外培養(yǎng)[21]
1.4.2骨髓間充質(zhì)干細胞轉(zhuǎn)染
1.4.3 細胞凋亡測定
1.4.4 Real-time PCR檢測GATA4、Wnt11和β-catenin的mRNA表達
1.4.5 Western blot法檢測GATA4蛋白的表達
1.5 主要觀察指標(biāo)
1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
2.1 5-氮雜胞嘧啶和miR1-2處理的骨髓間充質(zhì)干細胞中miR1-2的表達水平
2.2 5-氮雜胞嘧啶和miR-1模擬物對骨髓間充質(zhì)干細胞凋亡的影響
2.3 miR1-2的高度表達誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞中心臟特異性基因的表達
2.4 高表達miR1-2激活Wnt/β-catenin信號通路
2.5 miR1-2通過Wnt/β-catenin信號傳導(dǎo)激活誘導(dǎo)心肌細胞分化
3 討論Discussion
【參考文獻】:
期刊論文
[1]微小RNA參與心肌缺血再灌注損傷的作用機制及研究進展[J]. 王穎,王雷. 心血管病學(xué)進展. 2017(04)
[2]Wnt和Notch通路在老齡個體骨髓間充質(zhì)干細胞成骨中的調(diào)控[J]. 張建康,衛(wèi)俊俊,唐曌隆,余云波,敬偉. 國際口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(04)
[3]microRNA-184在小兒先天性心臟病中的表達及其與心肌細胞的關(guān)系[J]. 陳宏,陳群,齊鑫,于婷婷,吳士明,蘇玉明. 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志. 2017 (01)
[4]大鼠脂肪干細胞和骨髓間充質(zhì)干細胞向內(nèi)皮分化的能力比較[J]. 范麗君,肖倩蓉,林凱桑,王思妤,李章芳,李晨鐘,張彤,韓亞娟,沈潔. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016(09)
[5]microRNA-34a在肺癌細胞凋亡中的作用[J]. 金向宇,洪衛(wèi). 中華全科醫(yī)學(xué). 2016(06)
[6]胚胎干細胞對孕鼠缺血受損心肌的修復(fù)作用[J]. 王宏茂,邱彬,鄧然,王超,雍偉東,石琳. 中國實驗動物學(xué)報. 2016(02)
[7]MicroRNA-146a對人骨髓間充質(zhì)干細胞分化能力的影響[J]. 葉勖,王興兵,汪健,明靜. 中國實驗血液學(xué)雜志. 2016(02)
[8]骨髓間充質(zhì)干細胞通過血管生成作用治療慢性腎疾病的研究進展[J]. 賈曉靜,韓艷,潘晉兵,崔建軍. 國際泌尿系統(tǒng)雜志. 2016 (02)
[9]GATA-4在心肌損傷修復(fù)中的作用機制研究進展[J]. 賀繼剛,嚴(yán)丹,王平,李洪榮. 醫(yī)學(xué)綜述. 2015(22)
[10]誘導(dǎo)性多潛能干細胞在心血管疾病中的應(yīng)用[J]. 鄒琪,張新超. 中國心血管雜志. 2015(04)
本文編號:3726155
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