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人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶Pi基因的克隆及其蛋白的表達和純化

發(fā)布時間:2022-12-04 19:17
  谷胱甘肽 S-轉(zhuǎn)移酶(Glutathione-S-Transferase,GSTs)是一組具有多種生理功能的二聚體蛋白超基因家族酶系,GSTs能催化還原型谷胱甘肽的巰基結(jié)合到疏水的化合物上,使其失去結(jié)合DNA的活性,親電子物質(zhì)變成親水物質(zhì),易于從膽汁或尿液中排泄,通過這種方式將體內(nèi)、外源性化合物,如致癌物、斷裂劑產(chǎn)生的親電子物質(zhì)、有潛在毒性的物質(zhì)及親脂性化合物等降解排除。因此GSTs在機體轉(zhuǎn)化有毒化合物、保護細胞免受急性毒物攻擊且在抑制細胞癌變中發(fā)揮重要作用。已有證據(jù)表明,某些GSTs活性的喪失與肺癌、頭頸部、膀胱和結(jié)腸癌的高頻發(fā)生成正相關。GSTPi是GSTs超基因家族中π家族的成員,在肺臟的含量尤為豐富。由于GSTPi對芳香族化合物具有高降解活性,在解毒致癌原、預防癌腫發(fā)生過程中的重要作用,與毒理學、職業(yè)腫瘤及肺癌存在密切關系。 本研究用RT-PCR技術(shù)從人胎盤組織獲取人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶Pi(GSTPi)基因的cDNA序列,將其擴增產(chǎn)物GSTPi基因插入到原核克隆載體pMD18-T中,用PCR擴增、酶切分析及序列測定等方法對重組質(zhì)粒pMD18-T-GSTP... 

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
論文部分
    題目 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶Pi基因的克隆及其蛋白的表達和純化
        中文摘要
        英文摘要
        前言
    第一部分 人GSTPi基因的克隆與序列分析
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
        小結(jié)
    第二部分 GSTPi原核表達體系的構(gòu)建,蛋白的表達與純化
        材料與方法
        結(jié)果
        討論
        小結(jié)
    全文總結(jié)
    參考文獻
綜述部分
    題目 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶Pi基因與腫瘤研究
    參考文獻
縮略詞表
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶M1基因的克隆及在大腸桿菌的溫控表達[J]. 陳萍萍,吳逸明,張朝武,吳擁軍.  衛(wèi)生研究. 2003(03)
[2]高密度培養(yǎng)大腸桿菌表達重組人胰高血糖素樣肽-1[J]. 張志珍,毛積芳,楊生生,竇鴻.  第二軍醫(yī)大學學報. 2002(03)
[3]轉(zhuǎn)導GST-pi基因表達抑制甲基丙烯酸環(huán)氧丙酯的致癌作用[J]. 張敏磊,方福德.  科學通報. 1999(13)
[4]RT-PCR定量檢測GST-π mRNA的表達[J]. 陳高明,李春海,王堯河,馮東曉,孫麗亞,朱運峰.  中國腫瘤臨床. 1998(12)
[5]包涵體重組蛋白的純化及復性[J]. 紀劍飛,張成剛.  沈陽藥科大學學報. 1998(04)
[6]肺癌患者血漿GST-π水平測定及其臨床意義[J]. 戴廣海,石廷章,李春海.  中華腫瘤雜志. 1997(05)
[7]谷胱甘肽S─轉(zhuǎn)移酶基因型多態(tài)性問題[J]. 沈建華,林國芳,譚靖偉.  衛(wèi)生毒理學雜志. 1996(03)
[8]含PRPL啟動子的原核高效表達載體的組建及其應用[J]. 張智清,姚立紅,侯云德.  病毒學報. 1990(02)



本文編號:3708840

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