發(fā)布時間：2022-09-27 19:56

　　丙型肝炎病毒的基因組是一條9.4kb的單股正鏈RNA分子，NS5A基因片段位于全序列的6258-7600核苷酸位置，氨基酸位點1973-2420，SDS-PAGE測定為P58，在NS5A基因相當于編碼產(chǎn)物的C-末端2209-2248aa的區(qū)域，稱為干擾素敏感決定區(qū)（ISDR），被認為是不同基因型的HCV對干擾素治療反應性差異的分子學基礎。我們克隆了NS5A區(qū)這部分基因，進行了表達、純化，研究了NS5A抗原的作用特點，為建立檢測HCV NS5A抗體的血清學方法奠定基礎。本課題分以下三部分進行： 第一部分：丙型肝炎病毒NS5A片段的克隆 選取中國人輸血后丙型肝炎患者血液標本，抽提HCV基因組RNA為模板，根據(jù)RT-PCR設計上、下游引物，經(jīng)PCR擴增獲取NS5A基因片段1U1D；經(jīng)BamllI和KpnI雙酶切定向克隆到PMD18-T載體中，構建PMD18-T-1U1D重組質(zhì)粒。經(jīng)酶切、PCR、測序鑒定，目的基因克隆結果正確。 第二部分：丙型肝炎病毒NS5A基因片段的原核表達 將PMD18... 

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【學位級別】：碩士

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前言
第一部分 HCV NS5A基因片段的克隆
    一、 材料
    二、 方法
    三、 結果
    四、 討論
第二部分 HCV NS5A基因片段的原核表達
    一、 材料
    二、 方法
    三、 結果
    四、 討論
第三部分 HCV NS5A基因片段的免疫反應性分析
總結
參考文獻
附錄(一、二、三、四、五)
綜述



本文編號：3681521