丙型肝炎病毒的基因組是一條9.4kb的單股正鏈RNA分子，NS5A基因片段位于全序列的6258-7600核苷酸位置，氨基酸位點(diǎn)1973-2420，SDS-PAGE測(cè)定為P58，在NS5A基因相當(dāng)于編碼產(chǎn)物的C-末端2209-2248aa的區(qū)域，稱為干擾素敏感決定區(qū)（ISDR），被認(rèn)為是不同基因型的HCV對(duì)干擾素治療反應(yīng)性差異的分子學(xué)基礎(chǔ)。我們克隆了NS5A區(qū)這部分基因，進(jìn)行了表達(dá)、純化，研究了NS5A抗原的作用特點(diǎn)，為建立檢測(cè)HCV NS5A抗體的血清學(xué)方法奠定基礎(chǔ)。本課題分以下三部分進(jìn)行： 第一部分：丙型肝炎病毒NS5A片段的克隆 選取中國人輸血后丙型肝炎患者血液標(biāo)本，抽提HCV基因組RNA為模板，根據(jù)RT-PCR設(shè)計(jì)上、下游引物，經(jīng)PCR擴(kuò)增獲取NS5A基因片段1U1D；經(jīng)BamllI和KpnI雙酶切定向克隆到PMD18-T載體中，構(gòu)建PMD18-T-1U1D重組質(zhì)粒。經(jīng)酶切、PCR、測(cè)序鑒定，目的基因克隆結(jié)果正確。 第二部分：丙型肝炎病毒NS5A基因片段的原核表達(dá) 將PMD18... 

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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英文縮寫
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 HCV NS5A基因片段的克隆
    一、 材料
    二、 方法
    三、 結(jié)果
    四、 討論
第二部分 HCV NS5A基因片段的原核表達(dá)
    一、 材料
    二、 方法
    三、 結(jié)果
    四、 討論
第三部分 HCV NS5A基因片段的免疫反應(yīng)性分析
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄(一、二、三、四、五)
綜述



本文編號(hào)：3681521