小鼠FGF21基因克隆及his-mFGF21融合蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2022-08-06 16:40
目的:對小鼠FGF21基因進(jìn)行克隆并誘導(dǎo)表達(dá)FGF21融合蛋白。方法:以帶有小鼠FGF21的T載體pMD19-T-mFGF21為模板特異性擴(kuò)增FGF21基因片段,將擴(kuò)增產(chǎn)物克隆至pET-28a(+),得到pET-28a(+)-mFGF21的重組子,并轉(zhuǎn)化于大腸桿菌BL21(DE3),使用IPTG誘導(dǎo)融合蛋白的表達(dá),純化后采用Western Blot進(jìn)行鑒定。結(jié)果:pET-28(+)-mFGF21重組質(zhì)粒構(gòu)建成功,表達(dá)出可溶性的his-mFGF21融合蛋白,經(jīng)純化后該蛋白his-mFGF21可與FGF21抗體特異性結(jié)合。結(jié)論:成功構(gòu)建pET-28(+)-mFGF21重組子,并表達(dá)出his-mFGF21蛋白。
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 小鼠FGF21基因克隆及pET-28a (+) -mFGF21原核表達(dá)載體的構(gòu)建
1.2.2 融合蛋白his-mFGF21的原核表達(dá)
1.2.3 融合蛋白his-mFGF21的純化
1.2.4 Western Blot檢測
2 結(jié)果
2.1 小鼠FGF21基因克隆及pET-28a (+) -mFGF21原核表達(dá)載體的構(gòu)建
2.2 融合蛋白his-mFGF21的原核表達(dá)
2.3 融合蛋白his-mFGF21的純化
2.4 Western Blot檢測
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]成纖維細(xì)胞生長因子21對小鼠肝纖維化的作用及其機(jī)制[J]. 王大秀,韓繼武. 臨床肝膽病雜志. 2018(06)
[2]成纖維細(xì)胞生長因子21心肌保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 肖衛(wèi)晉,李國華,屈順林,任重,姜志勝. 中國動脈硬化雜志. 2017(05)
[3]FGF21生物學(xué)特征及對脂肪組織糖代謝的調(diào)節(jié)[J]. 呂欣,任毅,楊靜. 中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志. 2017(01)
[4]2型糖尿病合并動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制、臨床診斷與治療[J]. 石維. 中國老年學(xué)雜志. 2016(07)
[5]免疫系統(tǒng)與動脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉麗,張騰,陳瑜. 中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2015(08)
[6]動脈粥樣硬化發(fā)病的炎癥機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉俊田. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(02)
[7]成纖維細(xì)胞生長因子21對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化病變中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡的影響[J]. 伍熙,趙東暉,范謙,程姝娟,張銘,彭紅玉,柳景華. 中國動脈硬化雜志. 2014(04)
[8]FGF21與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性初探[J]. 唐青藍(lán),李紅梅,王劍青,管亞慧,雷霆雯,許慶忠. 貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(04)
本文編號:3669992
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 小鼠FGF21基因克隆及pET-28a (+) -mFGF21原核表達(dá)載體的構(gòu)建
1.2.2 融合蛋白his-mFGF21的原核表達(dá)
1.2.3 融合蛋白his-mFGF21的純化
1.2.4 Western Blot檢測
2 結(jié)果
2.1 小鼠FGF21基因克隆及pET-28a (+) -mFGF21原核表達(dá)載體的構(gòu)建
2.2 融合蛋白his-mFGF21的原核表達(dá)
2.3 融合蛋白his-mFGF21的純化
2.4 Western Blot檢測
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]成纖維細(xì)胞生長因子21對小鼠肝纖維化的作用及其機(jī)制[J]. 王大秀,韓繼武. 臨床肝膽病雜志. 2018(06)
[2]成纖維細(xì)胞生長因子21心肌保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 肖衛(wèi)晉,李國華,屈順林,任重,姜志勝. 中國動脈硬化雜志. 2017(05)
[3]FGF21生物學(xué)特征及對脂肪組織糖代謝的調(diào)節(jié)[J]. 呂欣,任毅,楊靜. 中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志. 2017(01)
[4]2型糖尿病合并動脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制、臨床診斷與治療[J]. 石維. 中國老年學(xué)雜志. 2016(07)
[5]免疫系統(tǒng)與動脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉麗,張騰,陳瑜. 中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2015(08)
[6]動脈粥樣硬化發(fā)病的炎癥機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 劉俊田. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(02)
[7]成纖維細(xì)胞生長因子21對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化病變中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡的影響[J]. 伍熙,趙東暉,范謙,程姝娟,張銘,彭紅玉,柳景華. 中國動脈硬化雜志. 2014(04)
[8]FGF21與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性初探[J]. 唐青藍(lán),李紅梅,王劍青,管亞慧,雷霆雯,許慶忠. 貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(04)
本文編號:3669992
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