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酒精對(duì)心肌組織影響的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-07-09 20:57
  目的:通過(guò)給小鼠腹腔注射不同濃度乙醇,建立一個(gè)早期的大量飲酒的動(dòng)物模型,運(yùn)用電鏡和光鏡技術(shù)觀察心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的變化,用酶細(xì)胞化學(xué)染色方法觀察心肌細(xì)胞細(xì)胞色素C氧化酶的活性變化,采用免疫組織化學(xué)方法觀察酒精對(duì)細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因BCL-2和BAX表達(dá)的影響,研究酒精對(duì)心臟毒性作用的機(jī)理。 方法:將60只健康雄性昆明種小白鼠隨機(jī)分為4組:酒精Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組和對(duì)照組,分別給予10%、20%、30%濃度酒精和生理鹽水腹腔注射,每日一次,連續(xù)處理30天后取材。部分標(biāo)本制成石蠟切片,經(jīng)HE染色,光鏡下觀察酒精對(duì)心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響;經(jīng)核固紅-結(jié)晶紫染色對(duì)心肌細(xì)胞凋亡情況進(jìn)行定量分析;用免疫組織化學(xué)的方法顯示酒精對(duì)心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2和BAX的表達(dá)情況,并利用圖像分析技術(shù)進(jìn)行定量分析。部分標(biāo)本制備透射電鏡標(biāo)本,電鏡下觀察酒精對(duì)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響。其余標(biāo)本置于恒冷箱切片機(jī)內(nèi),分別切15μm及40μm厚冰凍切片,細(xì)胞色素C氧化酶染色,光鏡下觀察酶活性變化,并利用圖像分析技術(shù)進(jìn)行定量分析;40μm厚冰凍切片,孵育后制作電鏡標(biāo)本,透射電鏡下觀察心肌細(xì)胞線粒體上細(xì)胞色素C氧化酶的... 

【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

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本文編號(hào):3657804

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