背景:間充質干細胞來源外泌體具有與母細胞類似的修復組織損傷的作用,但機制尚未完全闡明。巨噬細胞在組織損傷修復過程中扮演重要角色。因此,探討間充質干細胞來源外泌體對巨噬細胞極化的調控作用,將有助于闡明其組織修復的機制。目的:提取人臍帶間充質干細胞來源外泌體,并探討其對巨噬細胞極化的影響。方法:采用超速離心法提取人臍帶間充質干細胞分泌的外泌體,分別采用透射電鏡觀察其形態(tài)、納米顆粒追蹤法檢測粒徑、蛋白印跡法檢測標志蛋白表達;然后用得到的外泌體處理小鼠骨髓巨噬細胞,探討其對巨噬細胞極化的調控作用。結果與結論:①成功提取人臍帶間充質干細胞來源外泌體,其形態(tài)呈經(jīng)典的囊泡樣結構,直徑（92.0±34.1） nm,表達外泌體標志蛋白CD63和Alix;②該外泌體能顯著降低脂多糖誘導的巨噬細胞M1型活化標志腫瘤壞死因子α和一氧化氮合酶水平,而提高M2型活化標志白細胞介素10和精氨酸酶1水平;③結果可見,人臍帶間充質干細胞來源外泌體具有調控巨噬細胞向M2型極化的作用,進而發(fā)揮組織修復的功能。 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2019,23(13)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
    1.4 實驗方法
        1.4.1 分離培養(yǎng)人臍帶間充質干細胞采用實驗室建立的酶消化法分離臍帶間充質干細胞。
        1.4.2 人臍帶間充質干細胞表型鑒定
        1.4.3 外泌體提取
        1.4.4 外泌體鑒定
        1.4.5 小鼠骨髓巨噬細胞誘導及處理
        1.4.6 外泌體熒光標記
        1.4.7 CCK-8法檢測細胞增殖活力
        1.4.8 流式細胞儀檢測細胞周期
        1.4.9 總RNA提取和熒光定量PCR檢測
        1.4.1 0 ELISA檢測細胞上清中腫瘤壞死因子α和白細胞介素10水平
        1.4.1 1 Western blot檢測一氧化氮合成酶和精氨酸酶1的蛋白水平
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結果Results
    2.1 人臍帶間充質干細胞的形態(tài)及表型鑒定
    2.2 外泌體的提取與鑒定
    2.3 外泌體被巨噬細胞攝取
    2.4 外泌體不影響巨噬細胞增殖活力和周期
    2.5外泌體促進巨噬細胞向M2型極化
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]干細胞源外泌體應用于再生醫(yī)學的研究進展[J]. 張恩國,陳尚雅,楊葉,杜忠君,邵華.  中國組織工程研究. 2018(05)



本文編號：3639243