背景:間充質(zhì)干細胞來源外泌體具有與母細胞類似的修復(fù)組織損傷的作用,但機制尚未完全闡明。巨噬細胞在組織損傷修復(fù)過程中扮演重要角色。因此,探討間充質(zhì)干細胞來源外泌體對巨噬細胞極化的調(diào)控作用,將有助于闡明其組織修復(fù)的機制。目的:提取人臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體,并探討其對巨噬細胞極化的影響。方法:采用超速離心法提取人臍帶間充質(zhì)干細胞分泌的外泌體,分別采用透射電鏡觀察其形態(tài)、納米顆粒追蹤法檢測粒徑、蛋白印跡法檢測標(biāo)志蛋白表達;然后用得到的外泌體處理小鼠骨髓巨噬細胞,探討其對巨噬細胞極化的調(diào)控作用。結(jié)果與結(jié)論:①成功提取人臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體,其形態(tài)呈經(jīng)典的囊泡樣結(jié)構(gòu),直徑（92.0±34.1） nm,表達外泌體標(biāo)志蛋白CD63和Alix;②該外泌體能顯著降低脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細胞M1型活化標(biāo)志腫瘤壞死因子α和一氧化氮合酶水平,而提高M2型活化標(biāo)志白細胞介素10和精氨酸酶1水平;③結(jié)果可見,人臍帶間充質(zhì)干細胞來源外泌體具有調(diào)控巨噬細胞向M2型極化的作用,進而發(fā)揮組織修復(fù)的功能。 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2019,23(13)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
    1.4 實驗方法
        1.4.1 分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細胞采用實驗室建立的酶消化法分離臍帶間充質(zhì)干細胞。
        1.4.2 人臍帶間充質(zhì)干細胞表型鑒定
        1.4.3 外泌體提取
        1.4.4 外泌體鑒定
        1.4.5 小鼠骨髓巨噬細胞誘導(dǎo)及處理
        1.4.6 外泌體熒光標(biāo)記
        1.4.7 CCK-8法檢測細胞增殖活力
        1.4.8 流式細胞儀檢測細胞周期
        1.4.9 總RNA提取和熒光定量PCR檢測
        1.4.1 0 ELISA檢測細胞上清中腫瘤壞死因子α和白細胞介素10水平
        1.4.1 1 Western blot檢測一氧化氮合成酶和精氨酸酶1的蛋白水平
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 人臍帶間充質(zhì)干細胞的形態(tài)及表型鑒定
    2.2 外泌體的提取與鑒定
    2.3 外泌體被巨噬細胞攝取
    2.4 外泌體不影響巨噬細胞增殖活力和周期
    2.5外泌體促進巨噬細胞向M2型極化
3 討論Discussion


【參考文獻】：
期刊論文
[1]干細胞源外泌體應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)的研究進展[J]. 張恩國,陳尚雅,楊葉,杜忠君,邵華.  中國組織工程研究. 2018(05)



本文編號：3639243