目的 （1）建立結(jié)核桿菌抗原（Mtb-Ag）再刺激活化的人γδT細(xì)胞凋亡模型；（2）觀察不同濃度乙醇和二甲基亞砜（DMSO）致γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞凋亡及對細(xì)胞活性的影響：（3）探討神經(jīng)酰胺（C2-Cer）誘導(dǎo)γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞凋亡作用的不同之處；（4）應(yīng)用信號分子阻斷劑觀察PI3K，MAPK和PKC等信號傳導(dǎo)途徑在Mtb-Ag再刺激誘導(dǎo)γδT細(xì)胞凋亡中的作用。 方法 （1）正常人外周血單個核細(xì)胞分別用Mtb-Ag和CD3單抗（CD3mAb）刺激并加IL-2培養(yǎng)擴(kuò)增，分別獲得Mtb-Ag激活的T細(xì)胞（MtbAT）（γδT細(xì)胞為主）和CD3mAb激活的T細(xì)胞（CD3AT）（αβT細(xì)胞為主）。（2）培養(yǎng)15d～25d的MtbAT用3種濃度Mtb-Ag分別再刺激24h后，應(yīng)用Annexin-V-FITC／PI染色流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測γδT細(xì)胞凋亡。（3）MtbAT用Mtb-Ag（10.0μg／ml）分別再刺激3h、6h、12h、24h后，檢測γδT細(xì)胞凋亡情況。（4）用4種濃度乙醇和DMSO分別作用于MtbAT和CD3AT 4h、24h后，應(yīng)用Annexin-V-FITC／PI... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料和方法
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
        Mtb-Ag誘導(dǎo)γδT細(xì)胞凋亡模型的建立
        乙醇和DMSO對γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用
        神經(jīng)酰胺對γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用
        信號分子阻斷劑預(yù)處理對Mtb-Ag再刺激誘導(dǎo)γδT細(xì)胞凋亡的影響
3 結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述



本文編號：3628754