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結(jié)核桿菌抗原誘導(dǎo)活化的人γδT細(xì)胞凋亡機(jī)制探討

發(fā)布時(shí)間:2022-02-16 22:14
  目的 (1)建立結(jié)核桿菌抗原(Mtb-Ag)再刺激活化的人γδT細(xì)胞凋亡模型;(2)觀察不同濃度乙醇和二甲基亞砜(DMSO)致γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞凋亡及對(duì)細(xì)胞活性的影響:(3)探討神經(jīng)酰胺(C2-Cer)誘導(dǎo)γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞凋亡作用的不同之處;(4)應(yīng)用信號(hào)分子阻斷劑觀察PI3K,MAPK和PKC等信號(hào)傳導(dǎo)途徑在Mtb-Ag再刺激誘導(dǎo)γδT細(xì)胞凋亡中的作用。 方法 (1)正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞分別用Mtb-Ag和CD3單抗(CD3mAb)刺激并加IL-2培養(yǎng)擴(kuò)增,分別獲得Mtb-Ag激活的T細(xì)胞(MtbAT)(γδT細(xì)胞為主)和CD3mAb激活的T細(xì)胞(CD3AT)(αβT細(xì)胞為主)。(2)培養(yǎng)15d~25d的MtbAT用3種濃度Mtb-Ag分別再刺激24h后,應(yīng)用Annexin-V-FITC/PI染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)γδT細(xì)胞凋亡。(3)MtbAT用Mtb-Ag(10.0μg/ml)分別再刺激3h、6h、12h、24h后,檢測(cè)γδT細(xì)胞凋亡情況。(4)用4種濃度乙醇和DMSO分別作用于MtbAT和CD3AT 4h、24h后,應(yīng)用Annexin-V-FITC/PI... 

【文章來(lái)源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料和方法
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
        Mtb-Ag誘導(dǎo)γδT細(xì)胞凋亡模型的建立
        乙醇和DMSO對(duì)γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用
        神經(jīng)酰胺對(duì)γδT細(xì)胞和αβT細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用
        信號(hào)分子阻斷劑預(yù)處理對(duì)Mtb-Ag再刺激誘導(dǎo)γδT細(xì)胞凋亡的影響
3 結(jié)果
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述



本文編號(hào):3628754

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