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5-HT在脊髓水平增強GABA合成的機制

發(fā)布時間:2022-02-13 05:41
  5-羥色胺(5-HT)是神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)一種重要的神經(jīng)遞質(zhì),在脊髓水平的痛信息整合中扮演著重要的角色。迄今為止已發(fā)現(xiàn)并克隆出5-HT受體的7種類型14種亞型。既往在脊髓背角對5-HT及其受體的研究表明:①外周5-HT屬于致痛物質(zhì);而脊髓水平的5-HT主要對外周傷害性刺激發(fā)揮抑制性調(diào)控作用。②5-HT主要通過抑制脊髓背角興奮性中間神經(jīng)元、或者興奮脊髓背角γ-氨基丁酸(GABA)能抑制性中間神經(jīng)元,從而間接地抑制外周傷害性信息向淺層投射神經(jīng)元的傳遞。③脊髓背角分布有以下5-HT受體亞型:5-HT1A、5-HT1B、5-HT1D、5-HT2A、5-HT2C、5-HT3和5-HT4。但是,5-HT在脊髓水平究竟通過哪一種受體亞型介導(dǎo)、以怎樣的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、經(jīng)過哪些作用環(huán)節(jié)實現(xiàn)其鎮(zhèn)痛效應(yīng),尚有諸多不明之處。存在的問題主要有:①缺乏對脊髓背角進行特異性研究的研究工具和研究手段;②研究認為5-HT能夠促進脊髓背角中間抑制性神經(jīng)元釋放阿片肽類物質(zhì),如腦啡肽... 

【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省211工程院校

【文章頁數(shù)】:106 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

5-HT在脊髓水平增強GABA合成的機制


原代培養(yǎng)5一sd的脊髓背角神經(jīng)元在相差顯微鏡下觀察到,其細胞生長較為旺盛,細胞密度達到1xl護/mlA()

脊髓背角神經(jīng)元,亞型,瓊脂糖凝膠電泳,PCR擴增


5一HTZ^、5一HTZe、5一HT3、5一HT4、5一HTs^、5一HTSB、5一HT6和5一HT:等受體亞型mRNAs。各受體亞型陽性條帶的位置分別與其預(yù)期的PCR產(chǎn)物的大小相符(圖1.2)。利用Lbawokrs軟件所做的分析表明,各陽性條帶的密度存在差異。其中,5一HT:D和5一HT,;電泳條帶密度最高,5一HT!A、5一H幾^、5一HTZe、s一HT3、5一HT4、5一HTs^和5一HT6次之,5一HT,B、5一HTsB和5一HT:表達最弱。將上述PCR產(chǎn)物進一步克隆入pGEM一T載體,然后進行DNA測序

特性圖,脊髓背角神經(jīng)元,處理組,原代培養(yǎng)


圖2.1Rl’-PCR結(jié)果顯示對照組和5一HT處理組對原代培養(yǎng)脊髓背角神經(jīng)元表達c-Ofs、ppppEnk和GAD67的mNRAs的不同作用以及其時間變化特性。盯利用l閃總NR人樣本機引物進行。在pCR過程中,e-ofs、ppDyn、ppEnk、和GAD67的eDNA加入量分別為3、l、I和2林I,熱循環(huán)次數(shù)分別為27、27、28、27和8個.p一aetin作為對照,eDNA量為1閃,熱循環(huán)次數(shù)為23。N,正常對照組:C,生理鹽水處理組:T,5一HT處理組.(b)PPDYN匡噩二翻翔幼卻描均礴,乏比‘節(jié)5賈坦牙山節(jié)求~~~心~‘.時叫叫~~~.~加.恤ddd5‘比OJuJS切5.執(zhí)山甘節(jié)承N(c)ppENK3612hL、匡蛋凄‘~大蕓\!、山\,萬Lr一萬歲1224h期匆抽潤舊寫‘止uJ書五份巴身山節(jié)術(shù)

【參考文獻】:
期刊論文
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[2]5-HT1受體各亞型mRNAs在大鼠脊髓不同節(jié)段背角和腹角的表達(英文)[J]. 劉翔宇,武勝昔,王亞云,王文,李云慶.  神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2003(01)
[3]大鼠神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)5-羥色胺2A受體亞型的免疫組織化學(xué)定位(英文)[J]. 武勝昔,王亞云,王文,李云慶.  解剖學(xué)報. 2003(01)
[4]大鼠神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)5-羥色胺1A受體亞型的定位分布(英文)[J]. 武勝昔,王亞云,王文,李云慶.  神經(jīng)解剖學(xué)雜志. 2002(04)
[5]內(nèi)源性下行抑制/易化系統(tǒng)與5-羥色胺對脊髓傷害感受性信息的調(diào)制[J]. 張玉秋,吳根誠.  生理科學(xué)進展. 2000(03)
[6]體外培養(yǎng)脊髓神經(jīng)元過程中關(guān)于提高細胞產(chǎn)率以及活性的技術(shù)探討[J]. 楊浩,梁喆,鞠躬,鮑璿.  解剖學(xué)雜志. 1997(03)



本文編號:3622741

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