利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)使單純皰疹病毒1型（herpes simplex virus type 1,HSV-1）ul7、ul41、LAT基因缺失構(gòu)建M3減毒株（M3株）,在M3株基礎(chǔ)上通過(guò)缺失us3得到M4突變株（M4株）。本研究旨在分析野毒株（McKrae株）、M3株與M4株在毒力和抗細(xì)胞凋亡方面的差異。結(jié)果表明,McKrae組出現(xiàn)明顯的臨床癥狀,且100%死亡（P<0.001）,而M3、M4組未出現(xiàn)臨床癥狀。M4組小鼠組織中病毒載量明顯低于McKrae組和M3組;病理學(xué)檢測(cè)表明,McKrae組出現(xiàn)蛛網(wǎng)膜出血、膠質(zhì)小結(jié)等現(xiàn)象,而M3、M4組未見(jiàn)病理?yè)p傷,M4組炎性因子表達(dá)與McKrae、M3組相比也顯著下降（P<0.01）;免疫后M4組較M3組出現(xiàn)高水平的中和抗體、γ干擾素（interferonγ,IFN-γ）和白細(xì)胞介素4（interleukin 4,IL-4）抗原特異性T細(xì)胞;McKrae株再次感染時(shí),M4組小鼠組織中病毒載量明顯低于對(duì)照組和M3組;在人急性T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞中,M4株相比McKrae株和M3株可明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。 

【文章來(lái)源】：微生物與感染. 2019,14(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 毒株及細(xì)胞
    1.3 主要試劑
    1.4 增殖動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
    1.5 HSV-1感染小鼠及各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)
        1.5.1 分組
        1.5.2 臨床癥狀觀察
        1.5.3 組織病理檢測(cè)
        1.5.4 組織病毒載量檢測(cè)
        1.5.5 細(xì)胞因子表達(dá)分析
        1.5.6 T細(xì)胞功能分析
        1.5.7 中和抗體效價(jià)檢測(cè)
        1.5.8 細(xì)胞凋亡測(cè)定
    1.6 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果
    2.1 M4株的鑒定及 M3、M4株細(xì)胞水平的增殖動(dòng)力學(xué)分析
    2.2 M3和M4株感染BALB/c小鼠均無(wú)臨床癥狀
    2.3 us3基因突變可下調(diào)M4株在小鼠主要器官中的增殖
    2.4 us3基因突變保持了M3株的減毒特征
    2.5 us3基因突變下調(diào)機(jī)體炎癥反應(yīng)
    2.6 M3、M4株誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)
    2.7 M4株有更強(qiáng)的抑制體內(nèi)病毒增殖的能力
    2.8 us3基因功能性抑制可增強(qiáng)M4株誘導(dǎo)的體外細(xì)胞凋亡
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本文編號(hào)：3614754