旋毛蟲Ts87基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建及在體外真核細(xì)胞中的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2022-01-22 00:42
旋毛蟲病是一種世界范圍的人畜共患寄生蟲病。本病給國民經(jīng)濟(jì)和人類健康造成極大危害。旋毛蟲病的診斷和治療都比較困難,因而預(yù)防顯得尤為重要。由于旋毛蟲生活史的復(fù)雜性和抗原的多樣性,雖然近年來許多學(xué)者進(jìn)行了多方面的研究,但迄今為止,尚未發(fā)現(xiàn)免疫預(yù)防旋毛蟲病的有效措施。 DNA疫苗是90年代發(fā)展起來的一項(xiàng)新型疫苗技術(shù)。該技術(shù)將含有外源蛋白編碼序列的質(zhì)粒DNA注入某種動物,外源蛋白可以在體內(nèi)直接表達(dá)并持續(xù)刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。它不但可以產(chǎn)生保護(hù)性體液免疫,并且可以誘發(fā)強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性T細(xì)胞反應(yīng),因此普遍認(rèn)為,DNA疫苗極具發(fā)展?jié)摿,它的問世將為免疫預(yù)防旋毛蟲病提供新的途徑。 本實(shí)驗(yàn)的目的是按照研制核酸疫苗的技術(shù)路線,構(gòu)建目的基因的重組質(zhì)粒,將之轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞并檢測相應(yīng)蛋白的表達(dá),最終為旋毛蟲DNA疫苗的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。本研究采用通過免疫篩庫得到的旋毛蟲抗原基因片段Ts87與載體pCDNA3.1連接。該載體含有人類巨細(xì)胞病毒(CMV)的高效啟動子和增強(qiáng)子,是一種外源基因在哺乳動物細(xì)胞內(nèi)高效表達(dá)的理想載體。通過重新設(shè)計(jì)引物在Ts87兩端加上用于構(gòu)建重組質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)HindⅢ和BamH ...
【文章來源】:河北師范大學(xué)河北省
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
文獻(xiàn)綜述
正文前言
實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]pcDNA3.1(+)GDNF真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 趙永波,李鈺,張瑩,王楓,王喬樹,張貴寅,王維治. 中華神經(jīng)科雜志. 2001(01)
[2]人胰島素樣生長因子1的真核細(xì)胞表達(dá)及其鑒定[J]. 徐志偉,婁亞欣,李瑩,鄧鴻業(yè),鄧玉蘭. 免疫學(xué)雜志. 2001(01)
[3]核酸疫苗pcDNA3-γcC1誘導(dǎo)囊尾蚴細(xì)胞凋亡的作用[J]. 孫樹漢,郭瀛軍,陳蕊雯,楊樺. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(11)
[4]一起食源性人體感染旋毛蟲流行病學(xué)調(diào)查[J]. 李紅,李鳳恩. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2000(01)
[5]許昌市旋毛蟲病流行病學(xué)調(diào)查[J]. 崔兆麟,許汴利,王寶杰,李輝. 中國寄生蟲病防治雜志. 1999(04)
[6]CpG序列的免疫激活機(jī)理及應(yīng)用[J]. 陸軍,嚴(yán)維耀,鄭兆鑫. 生物技術(shù)通報(bào). 1999(05)
[7]金平縣一起人體旋毛蟲病暴發(fā)流行的調(diào)查報(bào)告[J]. 張皓明,龐顏坤. 醫(yī)學(xué)動物防制. 1999(01)
[8]丙型肝炎病毒核酸疫苗的免疫效果觀察[J]. 周旭,李益民,白植生. 微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 1997(04)
[9]鄭州市一起旋毛蟲病大暴發(fā)的流行病學(xué)調(diào)查及臨床觀察[J]. 崔晶,王中全,晉雪香,武峰. 中國人獸共患病雜志. 1997(02)
[10]旋毛蟲肌幼蟲及成蟲表面抗原對小鼠的免疫保護(hù)作用[J]. 竇蘭清,孫學(xué)勤,史曉紅,石磊,朱興全,牛炳亨. 中國獸醫(yī)科技. 1995(02)
本文編號:3601250
【文章來源】:河北師范大學(xué)河北省
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
文獻(xiàn)綜述
正文前言
實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]pcDNA3.1(+)GDNF真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在真核細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 趙永波,李鈺,張瑩,王楓,王喬樹,張貴寅,王維治. 中華神經(jīng)科雜志. 2001(01)
[2]人胰島素樣生長因子1的真核細(xì)胞表達(dá)及其鑒定[J]. 徐志偉,婁亞欣,李瑩,鄧鴻業(yè),鄧玉蘭. 免疫學(xué)雜志. 2001(01)
[3]核酸疫苗pcDNA3-γcC1誘導(dǎo)囊尾蚴細(xì)胞凋亡的作用[J]. 孫樹漢,郭瀛軍,陳蕊雯,楊樺. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2000(11)
[4]一起食源性人體感染旋毛蟲流行病學(xué)調(diào)查[J]. 李紅,李鳳恩. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2000(01)
[5]許昌市旋毛蟲病流行病學(xué)調(diào)查[J]. 崔兆麟,許汴利,王寶杰,李輝. 中國寄生蟲病防治雜志. 1999(04)
[6]CpG序列的免疫激活機(jī)理及應(yīng)用[J]. 陸軍,嚴(yán)維耀,鄭兆鑫. 生物技術(shù)通報(bào). 1999(05)
[7]金平縣一起人體旋毛蟲病暴發(fā)流行的調(diào)查報(bào)告[J]. 張皓明,龐顏坤. 醫(yī)學(xué)動物防制. 1999(01)
[8]丙型肝炎病毒核酸疫苗的免疫效果觀察[J]. 周旭,李益民,白植生. 微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展. 1997(04)
[9]鄭州市一起旋毛蟲病大暴發(fā)的流行病學(xué)調(diào)查及臨床觀察[J]. 崔晶,王中全,晉雪香,武峰. 中國人獸共患病雜志. 1997(02)
[10]旋毛蟲肌幼蟲及成蟲表面抗原對小鼠的免疫保護(hù)作用[J]. 竇蘭清,孫學(xué)勤,史曉紅,石磊,朱興全,牛炳亨. 中國獸醫(yī)科技. 1995(02)
本文編號:3601250
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