端粒酶逆轉(zhuǎn)錄功能區(qū)基因的表達、純化和抗體制備
發(fā)布時間:2021-12-22 04:13
端粒是真核細胞染色體末端的特殊結(jié)構,由呈串聯(lián)排列的重復亞單位DNA片段和端粒結(jié)合蛋白構成,保護染色體免于降解、末端重合、重排、和丟失,維持染色體的穩(wěn)定性和完整性。人端粒的重復亞單位序列為TTAGGG,長約5-20kb。體細胞每傳代一次,端?s短50-200bp,縮短至一定程度時(2-4kb)細胞衰老或死亡。 與正常細胞相比腫瘤衍生細胞系和生殖細胞的端粒并不隨細胞分裂進行性縮短,提示細胞內(nèi)存在將端粒片段加至端粒末端的酶。Greider和Blackburn驗證了端粒酶的存在,之后證實端粒酶是含RNA(端粒合成的模板)的核糖核蛋白,為RNA依賴性的DNA聚合酶,具有反轉(zhuǎn)錄活性。端粒酶可能在腫瘤無限增殖的維持中起重要作用。盡管現(xiàn)在端粒酶的激活機制還不甚明了,但可以確定端粒酶的激活能持續(xù)合成端粒并加到染色體末端,阻止其縮短,在癌癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起關鍵作用。它已成為一種新的腫瘤標記物及抗癌靶點 近來人端粒酶組分RNA和相關蛋白(TP1和hTRT)的分離、研究及其全基因的成功克隆,為圍繞端粒酶而進行的機制研究、端粒酶結(jié)構研究、端粒酶抑制劑研究、及其與臨床診斷和治療的相關研究等等提供了...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學廣東省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 hTERT逆轉(zhuǎn)錄功能區(qū)基因的克隆表達和鑒定
材料和方法
結(jié)果
討論
第二章 hTRT包涵體的溶解性分析
材料和方法
結(jié)果
討論
第三章 hTRT融合蛋白的純化和復性
材料和方法
結(jié)果
討論
第四章 hTRT融合蛋白多克隆抗體的制備
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
綜述
發(fā)表文章
【參考文獻】:
期刊論文
[1]端粒酶活性在腫瘤診治中的價值[J]. 易鐵男,周云峰. 現(xiàn)代診斷與治療. 2001(01)
[2]HeLa細胞端粒酶的分離純化及其蛋白質(zhì)組分的研究[J]. 周俊宜,羅超權. 生物化學與生物物理進展. 2000(04)
[3]端粒酶抑制劑與腫瘤治療[J]. 徐萍. 國外醫(yī)學(腫瘤學分冊). 1998(04)
本文編號:3545737
【文章來源】:南方醫(yī)科大學廣東省
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一章 hTERT逆轉(zhuǎn)錄功能區(qū)基因的克隆表達和鑒定
材料和方法
結(jié)果
討論
第二章 hTRT包涵體的溶解性分析
材料和方法
結(jié)果
討論
第三章 hTRT融合蛋白的純化和復性
材料和方法
結(jié)果
討論
第四章 hTRT融合蛋白多克隆抗體的制備
材料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]端粒酶活性在腫瘤診治中的價值[J]. 易鐵男,周云峰. 現(xiàn)代診斷與治療. 2001(01)
[2]HeLa細胞端粒酶的分離純化及其蛋白質(zhì)組分的研究[J]. 周俊宜,羅超權. 生物化學與生物物理進展. 2000(04)
[3]端粒酶抑制劑與腫瘤治療[J]. 徐萍. 國外醫(yī)學(腫瘤學分冊). 1998(04)
本文編號:3545737
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