目的研究干擾素γ（IFN-γ）對人羊膜間充質(zhì)干細胞（hAMSCs）的增殖、凋亡及相關(guān)細胞因子分泌水平的影響。方法在hAMSCs培養(yǎng)基中加入不同濃度IFN-γ,之后采用細胞增殖-毒性檢測試劑（CCK-8）檢測hAMSCs增殖情況,流式細胞術(shù)（FCM）檢測48 h時hAMSCs的凋亡情況,ELISA檢測上清中炎性因子可溶性白細胞抗原G（sHLA-G）、前列腺素E2（PGE-2）分泌水平和紫外分光光度法檢測犬尿氨酸（KYN）代謝含量。結(jié)果隨著培養(yǎng)時間的延長,無IFN-γ組和含不同濃度IFN-γ組中hAMSCs的增殖從第1天至第4天,均快速生長,隨后生長速度減慢;FCM檢測細胞凋亡結(jié)果顯示,100 ng/mL IFN-γ培養(yǎng)組和無IFN-γ組相比,hAMSCs無明顯凋亡（P=0.78）;不同濃度10¹00 ng/mL IFN-γ組同無IFN-γ組比較,PGE-2、sHLA-G分泌水平顯著增加（P <0.05）,同時吲哚胺2,3-二氧化酶（IDO）分解色氨酸的代謝產(chǎn)物KYN水平顯著增加（P <0.05）,IDO酶活性增強。結(jié)論 IFN-γ在不影響hAMSCs增殖... 

【文章來源】：實用醫(yī)學雜志. 2019,35(12)北大核心

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【部分圖文】：

SSEA4免疫熒光（×200）圖2.2不同濃度IFNγ對hAMSCs增殖的

實用醫(yī)學雜志2019年第35卷第12期TheJournalofPracticalMedicine2019Vol.35No.122.2不同濃度IFNγ對hAMSCs增殖的影響隨著IFNγ濃度的增加，hAMSCs增殖能力未受到明顯影響。無IFNγ組和含不同濃度IFNγ組中hAMSCs的增殖從第1天至第4天，均快速生長，隨后生長速度減慢（圖2）。2.3IFNγ對hAMSCs凋亡的影響IFNγ濃度為100ng/mL培養(yǎng)hAMSCs組與無IFNγ培養(yǎng)hAMSCs組比較，hAMSCs凋亡水平?jīng)]有差異（P=0.78）（圖3）。2.4IFNγ對hAMSCs細胞因子分泌水平的影響10ng/mL至100ng/mL濃度培養(yǎng)hAMSCs時sHLAG水平均明顯升高（P<0.001）（圖4A）；10ng/mLIFNγ組和無IFNγ組相比PEG2分泌水平無差別（P=0.068），30ng/mLIFNγ、50ng/mLIFNγ和無IFNγ組相比PEG2分泌水平升高（P<0.05），70ng/mLIFNγ、100ng/mLIFNγ和無IFNγ組相比PEG2分泌水平升高（P<0.01）（圖4B）；10ng/mL至100ng/mL濃度培養(yǎng)hAMSCs時上清中KYN水平均明顯升高（P<0.001），提示IDO酶活性較無IFNγ組明顯增強（圖4C）。3討論50年前IFNγ作為病毒抑制蛋白首次被FrederickWheelock發(fā)現(xiàn)，由NKs、Th1、細胞毒CD8+T細胞、巨噬細胞等分泌的重要促炎癥因子，在炎癥性疾病如GVHD的起始、發(fā)生、發(fā)展中起到重要作注：A，hAMSCs表面抗原FCM分析；B，SSEA4免疫熒光（×200）圖1hAMSCs免疫表型及免疫熒光鑒定Fig1IdentificationofimmunophenotypeandimmunofluorescenceofhAMSCsDAPISSEA4Merge0101

節(jié)作用。hAMSCs可通過IDO酶、sHLAG、白介素-10（interleukin10，IL10）、TGFβ1、PGE2等炎性介質(zhì)調(diào)節(jié)CD4+/CD8+T細胞，誘導免疫耐受作用，調(diào)節(jié)成熟樹突狀細胞（maturedendriticcells，mDCs）轉(zhuǎn)變成耐受性樹突狀細胞（tolerateddendriticcells，tDCs），進一步通過sHLAG誘導產(chǎn)生免疫抑制性調(diào)節(jié)性T細胞注：A，0ng/mLIFNγ組hAMSCs的凋亡；B，100ng/mLIFNγ組hAMSCs的凋亡；C，100ng/mLIFNγ組與0ng/mLIFNγ組凋亡比較，P>0.05圖3100ng/mLIFNγ對hAMSCs的凋亡影響Fig3ApoptosisofhAMSCsstimulatedwith100ng/mLIFNγ105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA105104103102PIA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA102103104105APCA2.30.92.01.00.61.30.50.20.70.62.11.40.70.61.10.60.30.6Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q4Q1Q2Q3Q40100IFNγ濃度（ng/mL）P>0.051.00.80.60.40.20.0凋亡百分比（%）ABC注：A，sHLAG分泌水平；B，PGE2分泌水平；C，KYN代謝水平；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001圖4IFNγ對hAMSCs炎性因子分泌水平的影響Fig4Effe

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3501309