目的:建立含有Calpain切割相關(guān)的β3胞漿尾段突變體的293T細(xì)胞模型,研究β3胞漿尾段不同氨基酸基序?qū)Ζ立騜β3介導(dǎo)的細(xì)胞功能的影響。方法:利用293T細(xì)胞模型建立共表達(dá)人類野生型整合素αⅡb和野生型β3或突變型β3(β3ΔNITY（β3胞漿段截去NITY基序）、β3Δ754（β3胞漿段截去羧基末端最后8個(gè)氨基酸TNITYRGT）、β3Δ759（β3胞漿段截去羧基末端最后3個(gè)氨基酸RGT）的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,通過(guò)細(xì)胞在固相化纖維蛋白原上的黏附及伸展試驗(yàn)檢測(cè)各穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的黏附及伸展功能。結(jié)果:成功建立了293T-αⅡbβ3ΔNITY、293T-αⅡbβ3Δ754、293T-αⅡbβ3Δ759、293T-αⅡbβ3細(xì)胞株,穩(wěn)定表達(dá)野生型整合素β3全長(zhǎng)的293T--αⅡbβ3細(xì)胞株較293T細(xì)胞具有良好的在固相化纖維蛋白原上的黏附和伸展能力,可以作為血小板的替代模型,而293T-αⅡbβ3ΔNITY穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的黏附和伸展能力稍低于293T-αⅡbβ3穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,但293T-αⅡbβ3Δ754細(xì)胞、293T-αⅡbβ3Δ759細(xì)胞株的黏附和伸展能力均明顯受損。結(jié)論:對(duì)整合素β3介導(dǎo)的細(xì)胞伸展功... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2019,27(01)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
材料和方法
    質(zhì)粒和細(xì)胞株
    試劑與儀器
    含有β3不同突變體的293T穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的建立
    流式細(xì)胞儀檢測(cè)整合素β3的表達(dá)
    細(xì)胞在固相化纖維蛋白原上的黏附及伸展試驗(yàn)
    小鼠血小板在纖維蛋白原上的黏附
    統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    整合素β3表達(dá)載體序列確認(rèn)
    含有β3不同突變體的293T穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的建立和鑒定
    各穩(wěn)定細(xì)胞株細(xì)胞在固相化纖維蛋白原上的伸展情況
    各穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株細(xì)胞在固相化纖維蛋白原上的黏附情況
討論



本文編號(hào)：3494428