發(fā)布時(shí)間：2021-11-12 02:05

　　目的優(yōu)化重組抗CD52單克隆抗體親和層析純化工藝。方法采用試驗(yàn)設(shè)計(jì)（Design of Experiment,DOE）方法優(yōu)化重組抗CD52單克隆抗體親和層析純化工藝,試驗(yàn)因子為中間清洗液Na Cl濃度（130⁸70 mmol/L）和洗脫液p H（3.50⁴.20）,試驗(yàn)響應(yīng)變量為純化后樣品收率、純度、殘余宿主蛋白含量、外源DNA含量及蛋白A含量,通過DOE構(gòu)建模型,預(yù)測中間清洗液Na Cl濃度和洗脫液p H范圍。同時(shí)采用DOE方法驗(yàn)證預(yù)測工藝參數(shù)的穩(wěn)定性。結(jié)果確定中間清洗液Na Cl濃度為400⁷00 mmol/L,洗脫液p H為3.55³.75。試驗(yàn)因子在該參數(shù)范圍內(nèi)變動(dòng)時(shí),樣品收率均大于80%,純度均大于97%,外源DNA濃度均低于260 pg/mg,宿主蛋白含量均低于2 300 ng/mg,蛋白A含量均低于6.5 ng/mg。結(jié)論成功優(yōu)化了重組抗CD52單克隆抗體的親和純化工藝,且具有較好的穩(wěn)定性。 

【文章來源】：中國生物制品學(xué)雜志. 2019,32(04)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 樣品
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 親和層析關(guān)鍵工藝參數(shù)篩選
    1.4 親和層析參數(shù)穩(wěn)定性驗(yàn)證
    1.5 純度檢測
    1.6 外源DNA含量檢測
    1.7 殘余宿主蛋白含量檢測
    1.8蛋白A含量檢測
    1.9 收率的計(jì)算
2 結(jié)果
    2.1 親和層析純化參數(shù)篩選
    2.2 親和純化參數(shù)的穩(wěn)定性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3489988