目的:骨髓組織中除了造血干細胞外,還存在一種非造血組織干細胞-骨髓間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cells,MSCs）。MSCs具有分裂、增殖、分化成多種細胞的潛能,在一定的體內(nèi)或體外誘導(dǎo)條件下,可以分化為脂肪細胞、軟骨細胞、成骨細胞、星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元細胞等。但成人骨髓中MSCs含量極低,為得到足夠數(shù)量MSCs應(yīng)用于臨床,需要體外培養(yǎng)、擴增和純化。同時干細胞在長期培養(yǎng)過程中,可能會出現(xiàn)微生物污染或基因型改變等情況,為獲得來源方便的間充質(zhì)干細胞,開展有效的干細胞移植及建立干細胞庫,需長期低溫保存間充質(zhì)干細胞。本研究目的在于建立穩(wěn)定的MSCs體外培養(yǎng)和擴增體系以及凍存最佳方案。方法:取正常成人骨髓用含10%胎牛血清的LG-DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)、擴增,將體外擴增培養(yǎng)P1細胞用含5%DMSO-30%FBS-DMEM凍存保護液重懸,細胞終濃度為1×106/ml,細胞分別用二步法和程控凍存方法凍存。低溫凍存3個月后40℃水浴快速復(fù)蘇細胞、培養(yǎng),探討低溫凍存對MSCs生物學(xué)特性的影響,比較二步法凍存和程控凍存方法的凍存效果。對凍存后細胞進行成骨、成脂肪和神經(jīng)元細胞誘導(dǎo),進一步證明... 

【文章來源】：浙江省免疫學(xué)會第五次學(xué)術(shù)研討會論文匯編浙江省科學(xué)技術(shù)協(xié)會會議論文集

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