發(fā)布時(shí)間：2021-11-09 09:48

　　目的證明移植脂肪干細(xì)胞及其誘導(dǎo)分化而來(lái)的施旺細(xì)胞有利于急性腦損傷動(dòng)物模型的功能恢復(fù)。探索細(xì)胞移植后縫隙連接在腦損傷修復(fù)過(guò)程中的作用機(jī)制。方法在運(yùn)動(dòng)皮層損傷偏癱大鼠模型中,將培育分化得到的脂肪干細(xì)胞及施旺細(xì)胞以及RNAi技術(shù)沉默Cx43基因的施旺細(xì)胞移植損傷灶處行原位培養(yǎng),術(shù)后觀察大鼠運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況并予評(píng)分。移植7 d后處死取鼠腦組織,RT-PCR和Western blot驗(yàn)證神經(jīng)生長(zhǎng)因子（NGF）的表達(dá)水平。結(jié)果在建立的運(yùn)動(dòng)皮層損傷的偏癱大鼠模型,細(xì)胞移植組大鼠優(yōu)于對(duì)照組運(yùn)動(dòng)評(píng)分。WB結(jié)果中對(duì)照組NGF表達(dá)明顯低于各移植組,Cx43基因沉默的施旺細(xì)胞移植后組織NGF表達(dá)低于未沉默組,Cx43基因未沉默組與脂肪干細(xì)胞移植組無(wú)顯著性差異。RT-PCR法測(cè)得對(duì)照組NGF mRNA水平明顯低于各移植組,施旺細(xì)胞組水平高于脂肪干細(xì)胞組、高于Cx43基因沉默施旺細(xì)胞組。結(jié)論移植脂肪干細(xì)胞和其經(jīng)誘導(dǎo)分化而來(lái)的施旺細(xì)胞,都有利于動(dòng)物模型的腦損傷后功能恢復(fù)。在腦損傷修復(fù)期功能性縫隙連接形成過(guò)程中,縫隙連接蛋白Cx43發(fā)揮了重要作用,可能通過(guò)促進(jìn)神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF的表達(dá)有關(guān)。 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019,39(06)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

移植用ADSC-SC細(xì)胞Fig.1InductionofADSC-SCsandidentificationofCx43expression.1:ADSC-SCswithRNAiforCx43,underlightmicroscope(A)andafterfluorescenceimmunocytochemistry(B).2:ADSC-SCswithRNAiforNC,underlightmicroscope(C)andafterfluorescenceimmunocytochemistry(D)

移植前各組細(xì)胞Cx43表達(dá)水平Tab.2Cx43expressioninADSCsandADSC-SCstransfectedwithRNAi-NCandRNAi-Cx43LanesCX43β-ActinsampleLane1178.98244.24A1Lane2154.25267.70A2Lane3164.09259.12A3Lane4160.33266.01B1Lane5169.54243.13B2Lane6172.41228.92B3Lane722.50250.33C1Lane825.87263.23C2Lane918.76257.92C3A1/2/3ADSCs.B1/2/3ADSCs-SCs+RNAi-NC;C1/2/3ADSCs-SCs+RNAi-CX43.CX43β-actinADSC-SCsADSC-SCs+RNAi-NC+RNAi-Cx43ADSC-SCs圖2移植前細(xì)胞Cx43表達(dá)WB結(jié)果：ADSC細(xì)胞經(jīng)NC對(duì)照組慢病毒轉(zhuǎn)染與Cx43沉默慢病毒轉(zhuǎn)染后Cx43表達(dá)差異Fig.2ExpressionofCx43inADSCsandADSC-SCstransfectedwithRNAi-NCandRNAi-Cx43.ThelevelofCx43inADSCs-SCswithRNAiforCx43groupissignificantlylowerthanbothADSCs-SCsgroupandADSCs-SCswithRNAiforNCcontrolgroup.*P<0.05vscontrolgroup.ADSC-SCsADSC-SCsADSC-SCswithRNAi-NCwithRNAi-Cx430.80.70.60.50.40.30.20.10levelofCx43expression*表3移植后各時(shí)間點(diǎn)各組GarciaJH評(píng)分Tab.3GarciaJHscoresineachgroupatdifferenttimepointsaftertransplantationTime(pt)1d3d6dGroup1Con(Mean±SD)6.40±0.897.20±1.92△8.00±1.22△□Group2ADSCs(Mean±SD)7.20±0.559.60±1.34*△11.00±1.41*△□Group3ADSC-SCs+RNAi-NC(Mean±SD)7.00±1.4110.00±0.71*△11.00±1.00*△□Group4ADSC-SCs+RNAi-Cx43(Mean±SD)6.65±0.559.00±0.71*△10.20±1.30*△□*P<0.05vscontrolgroup,△P<0.05vs1dpt;□P<0.05vs3dpt.NGF

Westernblot法測(cè)定各組NGF表達(dá)水平NGF

【參考文獻(xiàn)】：
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