發(fā)布時(shí)間：2021-11-08 14:23

　　目的:探討自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、P62及LC3B在肺炎鏈球菌感染小鼠肺部中的表達(dá)及意義。方法:生長至對數(shù)生長期的S.pn標(biāo)準(zhǔn)株D39用無菌PBS調(diào)節(jié)濃度為1.5×10⁹CFU/ml,采用鼻滴的方法對50只SPF級(jí)雌性Balb/c鼠（6⁸周,16²0 g）進(jìn)行處理,分別在感染后0、6、12、24、48h收集Balb/c小鼠支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）及肺組織,瑞氏-吉姆薩染色進(jìn)行BALF細(xì)胞計(jì)數(shù),HE染色觀察肺組織病理學(xué)改變,Western blot檢測自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、P62、LC3B在肺組織中的表達(dá)水平,免疫熒光觀察LC3B在肺組織中的表達(dá)情況。結(jié)果:HE染色顯示,小鼠鼻飼S.pn后12h及24h后肺組織內(nèi)出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞浸潤。BALF中總細(xì)胞數(shù)量及中性粒細(xì)胞數(shù)量于感染后6h開始增高（1.280±0.506、6.272±1.312,P=0.000;0.000±0.000、3.456±1.308,P=0.000）,在12h時(shí)達(dá)到高峰（1.280... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

經(jīng)鼻滴入法構(gòu)建肺炎鏈球菌感染小鼠肺部模型

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（2）BALF 的提取：小鼠分別在感染后 0、6、12、24、48h 提取小鼠肺泡灌，每組 5 只。小鼠麻醉、取眼球血、暴露氣管、支氣管及肺組織等步驟同前。小鼠氣管、支氣管及肺組織，用消毒縫線結(jié)扎氣管近端。注射器吸取 500ul 無0.01mol/L PBS 溶液，水平插入氣管，緩慢注射 PBS 溶液，可見肺組織因注射后膨脹而變大，反復(fù)抽吸 3 次，見圖 3。重復(fù)上述過程 1 次，共 1ml 無菌 PBS行支氣管肺泡灌洗（回抽率＞80%），冰上放置備用。

注：↗）炎癥細(xì)胞浸潤鼠鼻腔滴注濃度為 1.5×109CFU/ml D39 20ul 后不同時(shí)間點(diǎn)肺組織病理切片（色 ，100×、200×、400×）. 4 Pathological changes in lung tissues of mice at different time points after dr×109CFU/ml D39 20ul Streptococcus pneumoniae (HE staining,100×、200×、


本文編號(hào)：3483871