腎腺苷脫氨酶及其結(jié)合蛋白的分離純化和性質(zhì)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-14 18:35
目的:探討人腎細(xì)胞腺苷脫氨酶(ADA)的分子特性。方法:用免疫親和層析法分離純化人腎ADA,測(cè)氨法測(cè)定 ADA活性,經(jīng)SDS-PAGE測(cè)定其分子量。結(jié)果:獲得的ADA達(dá)電泳純,酶比活力為2561.41U/mg, 得率26.59%。經(jīng)SDS-PAGE分析,全酶由45.6KD的 小分子ADA亞單位和無ADA活性的結(jié)合蛋白(ADBP, 分子量分別為68.1KD和108.7KD)構(gòu)成。 用腺苷或脫氧腺苷作底物,測(cè)得全酶的Km值分別為 89μmol/L和67μmol/L,最適溫度37~40℃,最適pH 6.5~7.0。對(duì)氯苯甲酸能顯著抑制酶活性,二硫蘇糖 醇可使被抑制的酶活性得到部分恢復(fù)。 當(dāng)腺苷濃度在50~150μmol/L范圍內(nèi),ADBP對(duì)ADA 活性的抑制率為18.4%~21.5%。結(jié)論:人腎細(xì)胞中ADA為小分子ADA亞單位和無ADA活性 的ADBP構(gòu)成的大分子ADA,巰基是該酶活性中心的 必需基因,且ADBP對(duì)ADA活性有抑制作用。
【文章來源】:南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院江西省
【文章頁(yè)數(shù)】:39 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
小結(jié)
鳴謝
參考文獻(xiàn)
本文編號(hào):3436642
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【文章頁(yè)數(shù)】:39 頁(yè)
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