發(fā)布時(shí)間：2021-10-10 23:15

　　目的 研制抗人內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子-1（Endothelial cell specific molecule-1，ESM-1）單克隆抗體，并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定；探討ESM-1蛋白在腫瘤標(biāo)本中的表達(dá)。方法 采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，以人ESM-1蛋白為抗原，免疫BALB／C小鼠，取脾細(xì)胞與SP2／0，經(jīng)PEG融合，在HAT選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)兩周，用ELISA方法鑒定陽(yáng)性克隆、有限稀釋法篩選單克隆細(xì)胞株，并對(duì)其進(jìn)行特性分析：分析染色體核型；用Sigma公司的鼠單抗定型Immunotype^TM試劑盒進(jìn)行亞型分析；用Westen blot方法檢測(cè)單克隆抗體的特異性；用間接ELISA方法，測(cè)定了相對(duì)親和常數(shù)；并通過(guò)免疫熒光鑒定ESM-1在內(nèi)皮細(xì)胞ECV304中的表達(dá)。用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎癌組織中ESM-1的變化，同時(shí)用HE染色觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)。結(jié)果 獲得了7株穩(wěn)定分泌抗人ESM-1的雜交瘤細(xì)胞株，其中3A7細(xì)胞株特異性尤為顯著，效價(jià)高達(dá)1：6000。其染色體數(shù)目為100條左右，所分泌抗體亞型為IgG2b，親和常數(shù)為1.67x10⁴L／mol，對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞中... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 (抗人內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子-1單克隆抗體的制備及其特性鑒定)
    摘要(中文)
    摘要(英文)
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 (抗人內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子-1單克隆抗體的初步應(yīng)用)
    摘要(中文)
    摘要(英文)
    1 引言
    2 材料與方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
本課題的進(jìn)一步設(shè)想
致謝
附錄
綜述(內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤轉(zhuǎn)移)
    一、 細(xì)胞黏附分子
    二、 蛋白溶酶
    三、 血管生成
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子-1表達(dá)載體的構(gòu)建、體外表達(dá)及初步純化[J]. 張素梅,王雪,胡若磊,朱華慶,熊江霞,周青,桂淑玉,汪淵.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(06)
[2]腫瘤患者與正常人血小板表面粘附蛋白表達(dá)異同的臨床觀察及意義[J]. 張培彤,裴迎霞,樸炳奎,孫桂芝,林紅生,祁鑫.  中華腫瘤雜志. 1998(03)
[3]E-選擇素基因結(jié)構(gòu)功能、表達(dá)調(diào)控和構(gòu)效關(guān)系[J]. 蔡鈾慶,胡美茹,汲言山,沈倍奮.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 1996(02)



本文編號(hào)：3429334