背景 端粒酶（Telomerase）是一種核糖核蛋白，具有維護染色體末端結(jié)構(gòu)的功能；在細胞老化、癌變和永生化中具有重要的潛在作用。其中人類端粒酶的逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）在大約85-95％的人體腫瘤組織表達，是腫瘤的一個重要標志，檢測hTERT蛋白的表達情況在腫瘤的診斷和預后方面具有重要作用。 目的 制備人類端粒酶的逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）抗體并探索其在腫瘤檢測和研究中的應用。 方法 （1）利用pET原核表達載體構(gòu)建表達了hTERT特異性的T基序區(qū)和hTERT C區(qū)的重組蛋白，IPTG誘導重組蛋白表達，大量提取并純化重組蛋白包涵體；（2）應用純化的重組蛋白包涵體免疫家兔制備抗hTERT的抗體，同時留取免疫前血清做為陰性對照；（3）將純化的重組蛋白通過Western Blot檢測抗體產(chǎn)生情況并確定抗體滴度；（4）應用制備的抗體通過Western Blot、免疫組織化學法檢測腫瘤和腫瘤細胞系細胞中端粒酶的表達情況。 結(jié)果 （1）hTERT T基序區(qū)和C區(qū)重組蛋白在大腸桿菌中主要以包涵體形式存在，（2）以經(jīng)過純化的hTERT T基序區(qū)和C區(qū)兩種重組蛋白包涵體為抗原免疫家... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

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    實驗儀器和材料
    實驗方法
    結(jié)果
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