背景 端粒酶（Telomerase）是一種核糖核蛋白，具有維護(hù)染色體末端結(jié)構(gòu)的功能；在細(xì)胞老化、癌變和永生化中具有重要的潛在作用。其中人類端粒酶的逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）在大約85-95％的人體腫瘤組織表達(dá)，是腫瘤的一個重要標(biāo)志，檢測hTERT蛋白的表達(dá)情況在腫瘤的診斷和預(yù)后方面具有重要作用。 目的 制備人類端粒酶的逆轉(zhuǎn)錄酶（hTERT）抗體并探索其在腫瘤檢測和研究中的應(yīng)用。 方法 （1）利用pET原核表達(dá)載體構(gòu)建表達(dá)了hTERT特異性的T基序區(qū)和hTERT C區(qū)的重組蛋白，IPTG誘導(dǎo)重組蛋白表達(dá)，大量提取并純化重組蛋白包涵體；（2）應(yīng)用純化的重組蛋白包涵體免疫家兔制備抗hTERT的抗體，同時留取免疫前血清做為陰性對照；（3）將純化的重組蛋白通過Western Blot檢測抗體產(chǎn)生情況并確定抗體滴度；（4）應(yīng)用制備的抗體通過Western Blot、免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤和腫瘤細(xì)胞系細(xì)胞中端粒酶的表達(dá)情況。 結(jié)果 （1）hTERT T基序區(qū)和C區(qū)重組蛋白在大腸桿菌中主要以包涵體形式存在，（2）以經(jīng)過純化的hTERT T基序區(qū)和C區(qū)兩種重組蛋白包涵體為抗原免疫家... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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