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腸出血性大腸桿菌0157多重PCR檢測及其stx基因缺失突變株的研究

發(fā)布時間:2021-08-31 09:32
  腸出血性大腸桿菌(Enterohemorrhagic E.coli,EHEC),典型菌株為EHEC 0157:H7,是導致出血性結腸炎(Hemorrhagic Colitis,HC)和溶血性尿毒癥(Haemolytic Uraemic Syndrome,HUS)的主要病原菌。 鑒于EHEC 0157:H7在人類疾病中的地位日益突出,許多實驗室對其檢測手段都已進行了深入的研究。在EHEC 0157檢測上應用最為廣泛的是PCR技術,它是一種簡便、快速、敏感的鑒別和診斷方法。志賀毒素(Shiga toxin,Stx)由染色體上的溶原噬菌體編碼,包括兩個亞型Stx1和Stx2,它們相互之間沒有免疫交叉反應,不同的EHEC 0157:H7分離株可能表達Stx1,Stx2,或者兩種都表達;緊密素(intimin)基因eaeA位于LEE致病島上,是導致粘附與脫落(attaching and effacing,A/E)病變的重要毒力因子;H7抗原由fliC基因編碼,是EHEC 0157:H7的血清學標志之一。本研究以stx1、stx2、eaeA和fliC為目的基因設計引物,優(yōu)化了PCR反應條件,... 

【文章來源】:中國人民解放軍軍需大學吉林省

【文章頁數(shù)】:55 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

腸出血性大腸桿菌0157多重PCR檢測及其stx基因缺失突變株的研究


stx183bp缺失片段的擴增:1.P3和P4擴增產(chǎn)物(649bp)2.PI和PZ擴增產(chǎn)物(612bp);3.DNAMarker(DLZ000);4.擴增的二tx缺;

基因,兼作,堿基,缺失


和PZ擴增產(chǎn)物;失基因的擴增P2與P3的5’端18個堿基臂為模板,同時兼作引物,缺失的△就x基因片段(圖12345失片段的擴增:1.P3和P4;.arer

電泳圖,PCR鑒定,電泳,菌株


說明此菌株染色體上同源重組而交換,并且質粒/R、H7一F/R、StxZ一F/R、Stx鑒定(圖7),擴增出二e基于stXZ基因的缺失部分,因明該菌株即為EDL933w(△stx

【參考文獻】:
期刊論文
[1]產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)菌苗和腸出血性大腸桿菌(EHEC)菌苗研制現(xiàn)狀(下)[J]. 王真行.  國外醫(yī)學.預防.診斷.治療用生物制品分冊. 1999(06)



本文編號:3374660

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