發(fā)布時間：2021-07-30 22:47

　　目的探討基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α（SDF-1α）受體CXCR4、CXCR7在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）中蛋白和mRNA的表達(dá);及SDF-1α/CXCR4/CXCR7軸對BMSCs遷移作用的可能機(jī)制。方法體外培養(yǎng)大鼠BMSCs,流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞表面抗原CD29、CD44和CD34。應(yīng)用CXCR4特異性拮抗劑AMD3100及CXCR7中和抗體分別阻斷CXCR4及CXCR7,通過Western blotting和RT-PCR分別檢測BMSCs蛋白和mRNA的表達(dá)變化;Transwell法檢測細(xì)胞遷移能力。本次實驗分為單純BMSCs組（A）、AMD3100預(yù)處理BMSCs組（B）、CXCR7中和抗體預(yù)處理BMSCs組（C）及AMD3100+CXCR7中和抗體預(yù)處理BMSCs組（D）。結(jié)果經(jīng)鑒定第3代大鼠BMSCs中CD29和CD44均呈陽性表達(dá),而CD34表達(dá)陰性。BMSCs中CXCR4、CXCR7蛋白和mRNA均有表達(dá)。與A組相比,B組及D組CXCR4及CXCR7蛋白表達(dá)明顯受到抑制（P<0.05）,C組只有CXCR7蛋白表達(dá)降低（P<0.05）;各組CXCR4 mRNA和C... 

【文章來源】：解剖學(xué)報. 2014,45(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

BMSCs的培養(yǎng)與鑒定A．第3代BMSCs;B～D分別為流式細(xì)胞術(shù)檢測第3代細(xì)胞CD44、CD34、CD29表達(dá)標(biāo)尺示100μmFig．1CultureandidentificationofBMSCsA，ThethirdpassageofBMSCs;B-DistheexpressionofCD44，CD34，CD29ofthethirdpassagecellsbyflowcytometryrespectivelyBar=100μm

·642·解剖學(xué)報45卷，5期圖1BMSCs的培養(yǎng)與鑒定A．第3代BMSCs;B～D分別為流式細(xì)胞術(shù)檢測第3代細(xì)胞CD44、CD34、CD29表達(dá)標(biāo)尺示100μmFig．1CultureandidentificationofBMSCsA，ThethirdpassageofBMSCs;B-DistheexpressionofCD44，CD34，CD29ofthethirdpassagecellsbyflowcytometryrespectivelyBar=100μm圖2ＲT-PCＲ檢測不同處理組細(xì)胞CXCＲ4mＲNA、CXCＲ7mＲNA的表達(dá)情況M．DNA分子量標(biāo)準(zhǔn);A．單純BMSCs組;B．AMD3100組;C．CXCＲ7中和抗體組;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗體組，不同處理組細(xì)胞與單純BMSCs組相比，mＲNA表達(dá)無影響(x珋±s，n=3)Fig．2DetectionofCXCＲ4mＲNA，CXCＲ7mＲNAbyＲT-PCＲM，DNAmaker;A，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup．ComparedwithBMSCsgroup，theexpressionofmＲNAarenotchangedbydifferenttreatments(x珋±s，n=3)圖3Westernblotting檢測AMD3100及CXCＲ7中和抗體對BMSCs中CXCＲ4、CXCＲ7蛋白表達(dá)的影響A．單純BMSCs組;B．AMD3100組;C．CXCＲ7中和抗體組;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗體組，與單純BMSCs組相比，*P＜0.05，#P＜0.05;與AMD3100組相比，▲P＜0.05(x珋±s，n=3)Fig．3WesternblottinganalysisofCXCＲ4，CXCＲ7proteinexpressioninBMSCspretreatedwithAMD3100orCXCＲ7-specificneutralizingantibodyA，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;*P＜0.05，#P＜0.05，vsBMSCsgroup;▲P＜0.05，vsAMD3100group(x珋±s，n=3)

·642·解剖學(xué)報45卷，5期圖1BMSCs的培養(yǎng)與鑒定A．第3代BMSCs;B～D分別為流式細(xì)胞術(shù)檢測第3代細(xì)胞CD44、CD34、CD29表達(dá)標(biāo)尺示100μmFig．1CultureandidentificationofBMSCsA，ThethirdpassageofBMSCs;B-DistheexpressionofCD44，CD34，CD29ofthethirdpassagecellsbyflowcytometryrespectivelyBar=100μm圖2ＲT-PCＲ檢測不同處理組細(xì)胞CXCＲ4mＲNA、CXCＲ7mＲNA的表達(dá)情況M．DNA分子量標(biāo)準(zhǔn);A．單純BMSCs組;B．AMD3100組;C．CXCＲ7中和抗體組;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗體組，不同處理組細(xì)胞與單純BMSCs組相比，mＲNA表達(dá)無影響(x珋±s，n=3)Fig．2DetectionofCXCＲ4mＲNA，CXCＲ7mＲNAbyＲT-PCＲM，DNAmaker;A，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup．ComparedwithBMSCsgroup，theexpressionofmＲNAarenotchangedbydifferenttreatments(x珋±s，n=3)圖3Westernblotting檢測AMD3100及CXCＲ7中和抗體對BMSCs中CXCＲ4、CXCＲ7蛋白表達(dá)的影響A．單純BMSCs組;B．AMD3100組;C．CXCＲ7中和抗體組;D．AMD3100+CXCＲ7中和抗體組，與單純BMSCs組相比，*P＜0.05，#P＜0.05;與AMD3100組相比，▲P＜0.05(x珋±s，n=3)Fig．3WesternblottinganalysisofCXCＲ4，CXCＲ7proteinexpressioninBMSCspretreatedwithAMD3100orCXCＲ7-specificneutralizingantibodyA，BMSCsgroup;B，AMD3100group;C，CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;D，AMD3100+CXCＲ7-specificneutralizingantibodygroup;*P＜0.05，#P＜0.05，vsBMSCsgroup;▲P＜0.05，vsAMD3100group(x珋±s，n=3)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]纖維蛋白凝膠與幾丁質(zhì)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的影響[J]. 李冬梅,金連弘,張寶東,楊水友,李繼承.  解剖學(xué)報. 2009 (06)



本文編號：3312265