[目的] 觀察體外單層培養(yǎng)的髁突軟骨細(xì)胞加載機(jī)械壓力后增殖活性和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1mRNA（TGF-β1mRNA）表達(dá)在不同時(shí)點(diǎn)的變化；對(duì)壓力刺激導(dǎo)致的TGF-β1mRNA表達(dá)與軟骨細(xì)胞增殖之間的關(guān)系進(jìn)行初步探討。 [材料和方法] 選用新生SD大鼠的髁突軟骨作為原代培養(yǎng)的組織來源，建立髁突軟骨細(xì)胞有限細(xì)胞系；應(yīng)用靜壓力加載裝置對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞加載強(qiáng)度為120g／cm²的持續(xù)壓力1h。分別于加力后0、6、12、18、24h收集樣本，用流式細(xì)胞儀分析各樣本中細(xì)胞的DNA含量和細(xì)胞周期并計(jì)算增殖指數(shù)；用原位雜交技術(shù)檢測(cè)壓力作用后細(xì)胞TGF-β1mRNA的表達(dá)，以彩色病理圖象分析儀檢測(cè)各樣本表達(dá)的陽性率。對(duì)照組細(xì)胞除不加力外，其它培養(yǎng)條件和檢測(cè)方法與實(shí)驗(yàn)組相同。 [結(jié)果] 強(qiáng)度為120g／cm²的壓力作用1h，停止加力后體外培養(yǎng)的髁突軟骨細(xì)胞增殖活性和S期細(xì)胞百分比在加力結(jié)束時(shí)都較對(duì)照組增大（P＜0.05），但在加力后12h恢復(fù)，12～24h內(nèi)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖指數(shù)和S期細(xì)胞比例與對(duì)照組保持相同的變化趨勢(shì)和相似的水平；實(shí)驗(yàn)組TGF-β1mRNA... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

原代培養(yǎng)第3天，細(xì)胞圓形或多角形，倒置相差顯微鏡(xloo)

圖1.原代培養(yǎng)第3天，細(xì)胞圓形或多角形，倒置相差顯微鏡(xloo)圖2.原代培養(yǎng)第4天，細(xì)胞胞膜完整、胞漿均勻，分裂相多見.倒置相差顯微鏡(x400)圖3原代培養(yǎng)第12天，細(xì)胞間接觸緊密，細(xì)胞以圓形為主.(x200)圖4.第六代培養(yǎng)軟骨絕大多數(shù)為長(zhǎng)梭形。倒置相差顯微鏡(xlOO)

核內(nèi)可見1一2個(gè)核仁，可觀察到較多的細(xì)胞分裂像(圖2)。接種第12天左右細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底，鏡下見絕大多數(shù)細(xì)胞為圓形，彼此緊密接觸呈“鋪路石樣”(圖3)。四代以內(nèi)，細(xì)胞生長(zhǎng)過程中的形態(tài)與原代相似，第五代起出現(xiàn)長(zhǎng)梭形細(xì)胞;至六代時(shí)，則大多數(shù)細(xì)胞變成長(zhǎng)梭形(圖4)。H一E染色后，光鏡下見對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞呈圓形、多角形，胞體豐滿，胞漿均勻，胞核大而圓(圖5)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]靜張應(yīng)力與TGF-β1對(duì)大鼠髁突軟骨細(xì)胞增殖效應(yīng)調(diào)節(jié)初步研究[J]. 宋錦璘,羅頌椒,樊瑜波,趙志河,郭欣.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2003(01)
[2]人髁突軟骨細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞庫建立[J]. 焦巖濤,馬緒臣,于世鳳,張震康.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2001(06)
[3]兔下頜骨髁狀突軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)及生物學(xué)特性的研究[J]. 李松,沈麗寧,稅艷青,呂冰.  昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2000(04)
[4]機(jī)械壓力對(duì)大鼠下頜髁突軟骨細(xì)胞增殖活性影響的體外研究[J]. 楊紅梅,羅頌椒.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1999(04)
[5]下頜骨髁突軟骨細(xì)胞傳代過程中生物學(xué)特性變化[J]. 焦巖濤,王大章,韓文利,胡靜.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1999(04)
[6]髁突骨上組織掃描電鏡和透射電鏡的比較研究[J]. 段小紅,王惠蕓,李向黨,谷法有.  口腔醫(yī)學(xué)縱橫. 1999(01)
[7]負(fù)荷改變對(duì)髁突骨上組織細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)的影響——超微結(jié)構(gòu)的研究[J]. 段小紅,王惠蕓.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1999(01)
[8]功能矯形前伸大鼠下頜后髁突軟骨β轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Ⅰ型受體（TβR-Ⅰ）表達(dá)變化的研究[J]. 李小兵,羅頌椒,張世羽.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1998(04)
[9]功能矯形前伸大鼠下頜后髁突軟骨β轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-1（TGF-β1）表達(dá)變化的研究[J]. 李小兵,羅頌椒,張世羽.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1998(04)
[10]大鼠下頜功能前伸后激活髁突胰島素樣生長(zhǎng)因子1基因表達(dá)[J]. 周征,羅頌椒,劉聰.  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1998(06)



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