[目的] 觀察體外單層培養(yǎng)的髁突軟骨細胞加載機械壓力后增殖活性和轉(zhuǎn)化生長因子β1mRNA（TGF-β1mRNA）表達在不同時點的變化；對壓力刺激導(dǎo)致的TGF-β1mRNA表達與軟骨細胞增殖之間的關(guān)系進行初步探討。 [材料和方法] 選用新生SD大鼠的髁突軟骨作為原代培養(yǎng)的組織來源，建立髁突軟骨細胞有限細胞系；應(yīng)用靜壓力加載裝置對培養(yǎng)細胞加載強度為120g／cm²的持續(xù)壓力1h。分別于加力后0、6、12、18、24h收集樣本，用流式細胞儀分析各樣本中細胞的DNA含量和細胞周期并計算增殖指數(shù)；用原位雜交技術(shù)檢測壓力作用后細胞TGF-β1mRNA的表達，以彩色病理圖象分析儀檢測各樣本表達的陽性率。對照組細胞除不加力外，其它培養(yǎng)條件和檢測方法與實驗組相同。 [結(jié)果] 強度為120g／cm²的壓力作用1h，停止加力后體外培養(yǎng)的髁突軟骨細胞增殖活性和S期細胞百分比在加力結(jié)束時都較對照組增大（P＜0.05），但在加力后12h恢復(fù)，12～24h內(nèi)實驗組細胞增殖指數(shù)和S期細胞比例與對照組保持相同的變化趨勢和相似的水平；實驗組TGF-β1mRNA... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

原代培養(yǎng)第3天，細胞圓形或多角形，倒置相差顯微鏡(xloo)

圖1.原代培養(yǎng)第3天，細胞圓形或多角形，倒置相差顯微鏡(xloo)圖2.原代培養(yǎng)第4天，細胞胞膜完整、胞漿均勻，分裂相多見.倒置相差顯微鏡(x400)圖3原代培養(yǎng)第12天，細胞間接觸緊密，細胞以圓形為主.(x200)圖4.第六代培養(yǎng)軟骨絕大多數(shù)為長梭形。倒置相差顯微鏡(xlOO)

核內(nèi)可見1一2個核仁，可觀察到較多的細胞分裂像(圖2)。接種第12天左右細胞長滿瓶底，鏡下見絕大多數(shù)細胞為圓形，彼此緊密接觸呈“鋪路石樣”(圖3)。四代以內(nèi)，細胞生長過程中的形態(tài)與原代相似，第五代起出現(xiàn)長梭形細胞;至六代時，則大多數(shù)細胞變成長梭形(圖4)。H一E染色后，光鏡下見對數(shù)生長期的細胞呈圓形、多角形，胞體豐滿，胞漿均勻，胞核大而圓(圖5)。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3285844