目的 通過純化初乳獲得SIgA分泌片（SC），免疫家兔制備抗SC多克隆抗體；再對抗SC單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株進(jìn)行復(fù)蘇和擴(kuò)大培養(yǎng)，制備抗SC單克隆抗體。應(yīng)用抗SC單克隆抗體的高度特異性和抗SC多克隆抗體的較高親和力，通過配伍選擇，構(gòu)建成ELISA藥盒。并應(yīng)用藥盒對宮頸癌患者宮頸分泌物SIgA進(jìn)行初步研究，對不同病變期肝炎病人血清SIgA作進(jìn)一步探討。 方法 實驗分三部分：（1）SIgA和SC的分離純化及鑒定；（2）抗SC單克隆抗體ELISA藥盒的構(gòu)建；（3）抗SC單克隆抗體ELISA藥盒的臨床研究。 結(jié)果 初乳經(jīng)凝膠過濾、離子交換層析和鹽析，可分離得到SIgA和SC。所得產(chǎn)物經(jīng)免疫雙向擴(kuò)散、SDS-PAGE和免疫印跡法鑒定，進(jìn)一步確認(rèn)為SIgA和SC。通過高分子蛋白相對遷移率曲線可計算出SC的分子量約為75kD。將純化的SC免疫家兔制備抗SC多克隆抗體，經(jīng)鑒定，該抗體ELISA效價為1：5000，且為針對SC抗原的特異抗體。通過對抗SC單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株2D₁和4G₃的復(fù)蘇和擴(kuò)大培養(yǎng)，制備抗SC單克隆抗體，測得抗體ELIS... 

【文章來源】：四川大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 SC和SIgA的分離、純化及鑒定
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 抗SC單克隆抗體ELISA藥盒的構(gòu)建
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 抗SC單克隆抗體ELISA藥盒的臨床研究
    1 子宮頸癌患者局部分泌物SIgA的研究
        研究對象
        方法
        結(jié)果
        討論
        結(jié)論
    2 肝病患者血清SIgA研究
        研究對象
        方法
        結(jié)果
        討論
        結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述一 《SIgA分子結(jié)構(gòu)與功能相互關(guān)系》
綜述一參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述一 《SIgA臨床研究進(jìn)展》
綜述二參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3275142