氧化應(yīng)激損傷后的內(nèi)皮細(xì)胞對瓣膜間質(zhì)細(xì)胞生長的調(diào)控
發(fā)布時間：2021-07-09 16:48
目的建立過氧化氫介導(dǎo)的瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞（ECs）氧化應(yīng)激（OS）模型,探討OS作用下ECs和間質(zhì)細(xì)胞（VICs）之間的相互作用關(guān)系。方法不同濃度過氧化氫（H2O2）處理ECs不同時間后,收集OS-ECs上清;上清作用于VICs,通過檢測細(xì)胞增殖、凋亡、分化及存活率,驗(yàn)證OS-ECs上清對VICs生長有一定影響。結(jié)果隨著處理時間的延長,ECs和VICs均有不同程度受損。其中,50μmol/L H2O2處理ECs,OS-ECs上清可穩(wěn)定VICs生長狀態(tài)。結(jié)論 50μmol/L H2O2處理ECs并收集上清,作用于VICs是建立OS細(xì)胞模型的最佳條件。ECs對VICs有一定程度的保護(hù)作用。
【文章來源】：中國老年學(xué)雜志. 2019,39(05)北大核心
【文章頁數(shù)】：3 頁
【部分圖文】：
μmol/LH2O2氧化應(yīng)激作用下ECs在光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)(×40)
?界限清楚。48h略有皺縮，體積稍有縮小，72h后皺縮明顯，形態(tài)不規(guī)則，部分細(xì)胞脫壁懸浮，細(xì)胞密度明顯減小。見圖1。圖150μmol/LH2O2氧化應(yīng)激作用下ECs在光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)(×40)2.2OS-ECs上清液對VICs分化的作用Western印跡檢測表明VICs在OS-ECs上清液處理48h后α-SMA表達(dá)顯著升高，其表達(dá)量與24h相比差異顯著(P＜0.05)。72h后α-SMA的表達(dá)量回落，并維持在初始水平，與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1、圖2。圖2Western印跡法檢測α-SMA的表達(dá)吳昊等氧化應(yīng)激損傷后的內(nèi)皮細(xì)胞對瓣膜間質(zhì)細(xì)胞生長的調(diào)控第5期·5411·
2.3OS-ECs上清液對VICs凋亡的作用Western印跡法檢測表明VICs在OS-ECs上清處理48h后Caspase-3表達(dá)顯著升高，與24h相比差異顯著(P＜0.05)。72h后表達(dá)量回落，并維持在初始水平，與24h比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見圖3、表1。圖3Western印跡法檢測Caspase-3的表達(dá)2.4OS-ECs上清液對VICs增殖活性的作用Western印跡法檢測表明VICs在OS-ECs上清液處理后PCNA的表達(dá)量隨著時間的延長而降低，但48h、72h、96hPCNA的表達(dá)量與24h相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見圖4、表1。CCK-8結(jié)果表明，在OS-ECs上清液作用的各個時間點(diǎn)與24h相比，VICs的存活率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。圖4Western印跡法檢測PCNA的表達(dá)表1Western印跡法檢測結(jié)果及VICs存活率比較(x±s，n=4)組別a-SMACaspase-3PCNAVICs存活率(%)24h0．7868±0．23910．8035±0．26800．9396±0．21030．5158±0．208148h1．3891±0．24111)1．2873±0．15771)1．0519±0．21120．5163±0．125572h0．9358±0．28760．5492±0．26210．8403±0．40740．4038±0．082496h0．8991±0．41790．6249±0．27590．6896±0．44750．4793±0．0543與24h比較:1)P＜0．053討論VICs生物學(xué)行為的改變是導(dǎo)致瓣膜病最主要的原因〔9〕。本研究提示在H2O2的作用下，OS對Ecs的損傷隨著時間的延長而加重。結(jié)果表明在ECs損傷早期，OS-ECs上清能促進(jìn)VICs表達(dá)α-SMA和Caspase-3。α-SMA是肌纖維母細(xì)胞分化的表型標(biāo)志物，在組織損傷修復(fù)過程中，通過合成分泌大
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]過氧化氫介導(dǎo)人瓣膜間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激細(xì)胞模型的建立[J]. 熊普熹,韓林,劉曉紅,龔德軍,潘衛(wèi)軍,徐志云. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2015(01)
本文編號：3274116
【文章來源】：中國老年學(xué)雜志. 2019,39(05)北大核心
【文章頁數(shù)】：3 頁
【部分圖文】：
μmol/LH2O2氧化應(yīng)激作用下ECs在光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)(×40)
?界限清楚。48h略有皺縮，體積稍有縮小，72h后皺縮明顯，形態(tài)不規(guī)則，部分細(xì)胞脫壁懸浮，細(xì)胞密度明顯減小。見圖1。圖150μmol/LH2O2氧化應(yīng)激作用下ECs在光學(xué)顯微鏡下的形態(tài)(×40)2.2OS-ECs上清液對VICs分化的作用Western印跡檢測表明VICs在OS-ECs上清液處理48h后α-SMA表達(dá)顯著升高，其表達(dá)量與24h相比差異顯著(P＜0.05)。72h后α-SMA的表達(dá)量回落，并維持在初始水平，與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1、圖2。圖2Western印跡法檢測α-SMA的表達(dá)吳昊等氧化應(yīng)激損傷后的內(nèi)皮細(xì)胞對瓣膜間質(zhì)細(xì)胞生長的調(diào)控第5期·5411·
2.3OS-ECs上清液對VICs凋亡的作用Western印跡法檢測表明VICs在OS-ECs上清處理48h后Caspase-3表達(dá)顯著升高，與24h相比差異顯著(P＜0.05)。72h后表達(dá)量回落，并維持在初始水平，與24h比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見圖3、表1。圖3Western印跡法檢測Caspase-3的表達(dá)2.4OS-ECs上清液對VICs增殖活性的作用Western印跡法檢測表明VICs在OS-ECs上清液處理后PCNA的表達(dá)量隨著時間的延長而降低，但48h、72h、96hPCNA的表達(dá)量與24h相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見圖4、表1。CCK-8結(jié)果表明，在OS-ECs上清液作用的各個時間點(diǎn)與24h相比，VICs的存活率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。圖4Western印跡法檢測PCNA的表達(dá)表1Western印跡法檢測結(jié)果及VICs存活率比較(x±s，n=4)組別a-SMACaspase-3PCNAVICs存活率(%)24h0．7868±0．23910．8035±0．26800．9396±0．21030．5158±0．208148h1．3891±0．24111)1．2873±0．15771)1．0519±0．21120．5163±0．125572h0．9358±0．28760．5492±0．26210．8403±0．40740．4038±0．082496h0．8991±0．41790．6249±0．27590．6896±0．44750．4793±0．0543與24h比較:1)P＜0．053討論VICs生物學(xué)行為的改變是導(dǎo)致瓣膜病最主要的原因〔9〕。本研究提示在H2O2的作用下，OS對Ecs的損傷隨著時間的延長而加重。結(jié)果表明在ECs損傷早期，OS-ECs上清能促進(jìn)VICs表達(dá)α-SMA和Caspase-3。α-SMA是肌纖維母細(xì)胞分化的表型標(biāo)志物，在組織損傷修復(fù)過程中，通過合成分泌大
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]過氧化氫介導(dǎo)人瓣膜間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激細(xì)胞模型的建立[J]. 熊普熹,韓林,劉曉紅,龔德軍,潘衛(wèi)軍,徐志云. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2015(01)
本文編號：3274116
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