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建立血管內(nèi)皮細胞敲除DEPTOR基因小鼠模型及鑒定

發(fā)布時間:2021-06-28 05:55
  背景:目前關于DEPTOR與血管類疾病的研究較少,在動物體內(nèi)研究尚未發(fā)現(xiàn),因此建立一種新的血管內(nèi)皮特異性敲除DEPTOR的小鼠模型對于研究DEPTOR與血管類疾病的關系尤為重要。目的:建立血管內(nèi)皮細胞敲除DEPTOR基因純合子小鼠模型,并進行鑒定。方法:Cre小鼠,DEPTORflox/+雄鼠,均購于美國Jackson實驗室;C57野生型小鼠購自華中科技大學。實驗方案經(jīng)中國人民解放軍中部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院動物實驗倫理委員會批準(批準號:20120034)。選取5只DEPTORflox/+雄鼠與10只DEPTOR flox/+雌鼠進行交配,得到基因型為EPTORflox/flox及DEPTORflox/+的F1子代小鼠35只,與8只血管內(nèi)皮細胞特異性表達Tek+重組酶的Cre小鼠進行交配,一共得到基因型為Tek-Cre+×DEPTORflox/flox和DEPTORflox/flox子代小鼠共65只。... 

【文章來源】:中國組織工程研究. 2019,23(23)北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
文章快速閱讀:
文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
    1.4 實驗方法
        1.4.1 DEPTORflox/flox純合子小鼠的養(yǎng)殖及鑒定
        1.4.2 Tek-Cre小鼠的養(yǎng)殖及鑒定
        1.4.3 血管內(nèi)皮細胞敲除DEPTOR基因純合子小鼠的繁殖和鑒定
        1.4.4 Western blotting法檢測Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠與單純DEPTORflox/fllox小鼠肝臟組織的DEPTOR蛋白表達
        1.4.5 免疫熒光法檢測Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠與單純DEPTORflox/fllox小鼠主動脈血管內(nèi)皮細胞的DEPTOR蛋白表達
    1.5 主要觀察指標
    1.6 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果Results
    2.1 DEPTORflox小鼠基因型鑒定結(jié)果
    2.2 Tek-Cre小鼠基因型鑒定結(jié)果
    2.3 血管內(nèi)皮細胞敲除DEPTOR基因純合子小鼠的鑒定結(jié)果
    2.4 Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠與DEPTORflox/flox小鼠肝臟組織DEPTOR蛋白表達
    2.5 Tek-Cre+×DEPTORflox/flox小鼠與DEPTORflox/flox小鼠胸主動脈DEPTOR免疫熒光染色結(jié)果
3 討論Discussion


【參考文獻】:
期刊論文
[1]冠心病合并糖尿病應用奧美沙坦酯對患者血管內(nèi)皮細胞功能的影響作用[J]. 周政榮,丁麗娜.  北方藥學. 2018(11)
[2]CD1d基因敲除小鼠拮抗DSS誘導結(jié)腸炎[J]. 李嬌,陳永文,張慶鎬.  免疫學雜志. 2018(09)
[3]條件性胰島β細胞DEPTOR基因敲除小鼠構(gòu)建及鑒定[J]. 賴舒暢,邱鴻,王肖,潘道延,王楨鈺,李凱,白曉春,沈潔.  實用醫(yī)學雜志. 2018(04)
[4]血管內(nèi)皮細胞敲除Rheb基因雜合子小鼠模型建立及意義[J]. 丁燕,賴麗芬,奈文青,單蘭蘭,陳順枝,吳洪淵,唐鈺,戴萌.  山東醫(yī)藥. 2017(36)
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[8]PI3K/Akt/mTOR信號通路及臨床相關腫瘤抑制劑[J]. 陳銀濤,于秉治,武迪迪.  中國生物化學與分子生物學報. 2014(10)
[9]Cre-LoxP重組系統(tǒng)刪除內(nèi)源性選擇標記基因的效能評價[J]. 王志蕊,劉西梅,周荊榮,鄭新民,魏慶信,董發(fā)明,畢延震.  中國生物化學與分子生物學報. 2014(02)
[10]銀杏內(nèi)酯B對內(nèi)皮細胞的保護作用及分子機制研究[J]. 馬麗娜,陳北冬,趙艷陽,鮑利,吳偉,李興廣,齊若梅.  中國藥理學通報. 2013(02)



本文編號:3253758

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