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大鼠骨髓胚胎樣干細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定

發(fā)布時(shí)間:2021-06-19 13:10
  目的:探索骨髓胚胎樣干細(xì)胞(ELSCs)的分離純化和鑒定方法,并探討該細(xì)胞分離培養(yǎng)方法的可行性。方法:采用全骨髓培養(yǎng)、明膠包被和無(wú)血清培養(yǎng)的方法,培養(yǎng)SD大鼠骨髓細(xì)胞,5 d后進(jìn)行第1次傳代,以后每2 d傳代1次。觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu);免疫熒光檢測(cè)其表面標(biāo)志物CD73、CD90、CD105、SSEA-4、Sox-2、Nanog;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)干性標(biāo)志物SSEA-4、OCT-4、Sox-2、Nanog的表達(dá),并與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)相比較;檢測(cè)其向成骨細(xì)胞和成脂細(xì)胞的誘導(dǎo)分化能力。結(jié)果:獲得的ELSC呈現(xiàn)長(zhǎng)梭形,體積小且形態(tài)均一。免疫熒光示其表達(dá)CD73、CD90、CD105、SSEA-4、Sox-2、Nanog;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)示ELSCs表達(dá)CD73、CD90、CD105,且純度高于95%,與MSCs相比,ELSCs的SSEA-4、OCT-4、Sox-2、Nanog等干性基因表達(dá)較高。結(jié)論:該方法獲得的ELSCs干性較強(qiáng)、強(qiáng)度較高,可分離、培養(yǎng)出ELSCs。 

【文章來(lái)源】:解剖學(xué)雜志. 2019,42(03)

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【部分圖文】:

大鼠骨髓胚胎樣干細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定


流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志Fig3CellsurfacemakersbyflowcytometryA:ExpressionofmarkersinELSCs;B:ExpressionofstemnessgeneinELSCsandMSCs—242—

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]骨髓胚胎樣干細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征觀察[J]. 龐榮清,張永云,鄧永麗,馬麗花,何潔,趙晶,潘興華,張成.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué). 2012(09)



本文編號(hào):3237874

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