目的： 摸索體外精原干細(xì)胞分離純化的條件，并由此建立一套比較穩(wěn)定的分離純化方法與技術(shù)。研究IGF-I在維持體外培養(yǎng)的精原干細(xì)胞自我更新、增殖過程中所起到的調(diào)控作用，以及探討IGF-I影響精原干細(xì)胞自我分裂的可能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。初步探索精原干細(xì)胞體外存活的適宜環(huán)境，建立由生長(zhǎng)因子為促存活因素而形成的體外培養(yǎng)體系。方法： 不連續(xù)密度Percoll梯度液分離純化精原干細(xì)胞，并利用選擇性貼壁法進(jìn)一步純化精原干細(xì)胞；c-Kit細(xì)胞免疫組化鑒定細(xì)胞類型，通過顯微鏡下隨機(jī)10個(gè)視野細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行定量分析確定其純度；臺(tái)盼藍(lán)排斥實(shí)驗(yàn)確定精原干細(xì)胞的活力；在體外培養(yǎng)的10d SD大鼠的原代精原干細(xì)胞培養(yǎng)過程中加入不同濃度的IGF-I，于72h進(jìn)行MTT檢測(cè)精原干細(xì)胞的存活數(shù)，觀察IGF-I對(duì)精原干細(xì)胞的促增殖作用；本研究分別加入PD98059、SB203580、BisindolymaleimideⅢ等 （三者分別為Ras-MAPK、JAK-STAT、PKC等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的特異抑制劑）進(jìn)行阻斷，于72h進(jìn)行MTT檢測(cè)，推斷IGF-I影響精原干細(xì)胞增殖的可能信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。結(jié)果： 1、c-Kit細(xì)胞免疫組化結(jié)果顯示... 

【文章來源】：南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院江西省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

IGF-I作用后大

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]mRNA差異顯示法克隆小鼠精子發(fā)生相關(guān)基因-p38MAPK基因[J]. 鄭英,李建民,郭金虎,單玉喜,祝輝,王黎熔,周作民,林敏,沙家豪.  解剖學(xué)報(bào). 2001(03)



本文編號(hào)：3212764