目的探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（huc MSCs）對(duì)人真皮成纖維細(xì)胞（HDFib）增殖與細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)的影響及其可能機(jī)制。方法采用II型膠原酶消化法從新生兒臍帶中分離制備huc MSCs,用流式細(xì)胞術(shù)鑒定P₃代huc MSCs表面標(biāo)記抗原,用油紅O染色、茜素紅S染色和Masson染色進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞三向分化能力鑒定;隨后與P₃代HDFib進(jìn)行transwell共培養(yǎng),對(duì)照組transwell小室上添加等量培養(yǎng)基,觀察24、48和72 h時(shí)兩組HDFib的細(xì)胞形態(tài),CCK8法進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè),q RT-PCR法測(cè)定培養(yǎng)24和48h時(shí)HDFib主要細(xì)胞外基質(zhì)蛋白collagenI、elastin、fibronectin、MMP-1和細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因PI3K、Akt、p38和caspase3 mRNA表達(dá)水平。結(jié)果制備獲得的hucMSCs呈典型成纖維細(xì)胞樣并貼壁生長(zhǎng),其表面間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)志性抗原CD105、CD90、CD73陽(yáng)性表達(dá)率分別為96.97%、99.75%和99.81%,誘導(dǎo)培養(yǎng)16d后出現(xiàn)明顯的成脂、成骨和成軟骨細(xì)胞特性。huc... 

【文章來源】：中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù). 2019,14(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 試劑與耗材
        1.1.2 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 hucMSCs的分離培養(yǎng)
        1.2.2 hucMSCs表面抗原檢測(cè)
        1.2.3 hucMSCs三向分化檢測(cè)
        1.2.4 Transwell
        1.2.5 細(xì)胞增殖檢測(cè)
        1.2.6 qRT-PCR檢測(cè)基因
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 hucMSCs表面抗原鑒定
    2.2 hucMSCs三向分化能力鑒定
    2.3 hucMSCs對(duì)HDFib細(xì)胞生長(zhǎng)及形態(tài)的影響
    2.4 hucMSCs對(duì)HDFib增殖的影響
    2.5 hucMSCs對(duì)HDFib膠原合成基因表達(dá)的影響
    2.6 hucMSCs對(duì)HDFib增殖和細(xì)胞外基質(zhì)調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]程控降溫法與二步法對(duì)胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞凍存效果的影響[J]. 章毅,陳侃俊,李萍,李冉,陳亮,陸薇,伍婷,金魏名.  中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù). 2017(06)
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碩士論文
[1]EGCG抑制UVB及UVA誘導(dǎo)的人皮膚成纖維細(xì)胞MMP-1水平及其相關(guān)分子機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 潘敏.南京醫(yī)科大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3191390